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先天性心脏病患者先天性心脏病患者 等病原感染的调查研究
王晓明张国成韩美玉许东亮
【摘要】目的探讨人微小病毒 ( ),弓形体( , ),风疹病毒
( , ),巨细胞病毒( , )和单纯疱疹病毒 型(
, )的感染与先天性心脏病的关系.方法采用病例对照研究,以先天性心脏病心肌组织及正
常心脏心肌组织为标本,用 或 技术进行病毒基因的调查.结果在 例先天性心脏病
心肌组织中检测到 , , 和 的阳性率分别为 ! ", #! ", #! "和$!#".% 例对
照中 , , 和 的阳性率分别为&",%", "和%". , 在两组中检测差异有显
著性( ''&!&#), , 在两组中无统计学意义( (&!&#).在%&例先天性心脏病中 阳性率
%!%", &例对照中均阴性,两组间差异有显著性( )&!&% ).结论在先天性心脏病心肌组织中
检测到了 , , , 和 基因,调查表明, , 和 的感染是重要的危险因子,它可
能与先天性心脏病的发病有关, , 的感染与先天性心脏病无明显关系.
【主题词】先天性心脏病;微小病毒;弓形体;风疹病毒;巨细胞病毒;单纯疱疹病毒
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1 - 23
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基金项目:国家计生委基金资助项目( *% )
作者单位:第四军医大学西京医院老年病科(王晓明);儿科(张
国成,韩美玉,许东亮)
通信作者:王晓明,* &&% 西安,第四军医大学西京医院老年病
科(8 :1 , , +- 30 )
先天性心脏病(先心病)是儿科常见的疾病,严
重危害着儿童的健康和生命,其病因迄今尚未完全
确定,采用 或 技术对先天性心脏病心
肌组织进行 等病原基因的调查尚未见报道,现
报告如下.
材料与方法
研究对象:病例组 例先天性心脏病心肌组织
取材于:( ) **9 年第四军医大学病理解剖教
研室尸解标本 例,男 *例,女 例,死龄最小
天,最大 岁,平均%! 岁.( ) 年 月9 *
年 月西京医院心脏外科住院部分患者手术活检心
脏标本%*例,男 #例,女 例,年龄最小 岁,最大
%#岁,平均 !#岁.病种有:室间隔缺损% 例,房间
隔缺损 例,法乐氏四联症 例,法乐氏五联症
例,动脉导管未闭%例,右心双出口 例,肺动脉狭
窄 例,室间隔缺损并主动脉关闭不全 例,室间隔
缺损并右室流出道梗阻 例.
对照组% 例系非先天畸形心脏组织标本,其中
( )同期尸解标本%&例,病种有:新生儿窒息 &例,
新生儿硬肿症#例,呼吸窘迫综合症 例,肺炎合并
心衰 例,风湿性心脏病 例.( )同期住院手术的
风湿性心瓣膜病心脏标本 例.
病原: 病毒质粒由沙特皇家医院研究中心提
&* 中华微生物学和免疫学杂志 &&&年第 &卷第 期 - ,: 0 ; , , 0- &&&, &,5 3
表 , , , 和 引物及其核苷酸位置
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供, '' ,( !,+ 病毒株均由本校微生物教研室分
子病毒室提供, )*由本室保存.
引物:按文献〔 , 〕, 引物由上海生物工程
研究所合成,其余#种病原引物由美国 - ) + 公
司合成,其引物序列及所在核酸碱基位置见表 .
试剂及仪器: ./ 聚合酶,#01/ , "0
+ ,琼脂糖,+/ 均系 公司产品,异
硫氰酸胍及 2 系 公司产品,.3 , 巯
基乙醇系45 6 公司产品. +扩增仪系美国''78
+ 公司产品.
!"的提取:详见文献〔%〕,石蜡标本切片经脱
蜡,脱脂(组织标本剪碎,研磨成浆),消化裂解,酚
氯仿抽提,无水乙醇沉淀, 3溶解, !"9保存.
!"的提取及 !"的合成:采用异硫氰酸胍
酚 氯仿一步抽提法〔$〕.盲法加入+ ,+!引物按
'' 逆转录试剂盒进行+ ./ 合成.
反应:以提取的./ 或 ./ 为模板按文
献〔 , 〕条件, ./ 的扩增以 , !为外引物,
, #为内引物,按套式进行!次扩增, '' ,( !,
)*和+ 按其相应的引物进行序列扩增.用!:
琼脂糖电泳,于紫光灯下分析结果.实验重复 次.
统计方法:用 . 提供的3 - 8"统计
软件包进行 !和4 '' 确切概率检验.
结果
;在$$例先心病心脏标本中 , )*, '' 和
( !阳性例数(阳性率)分别为 !例( &;!:), "
例( ;!:), %例(! ;&:)和 例(#; :);而对照组
&例中 , )*, '' 和( !阳性例数(阳性率)
分别为"例(":), 例(!;$:),&例(! ; :)和 例
(!;$:).两组间比较, , )*差异有显著性( ; $, >
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是 , )*感染为先心病发病的有意义因素()+值
分别为!#; 与&;$ ),见表 .
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讨论
目前除风疹病毒致先心病已确定外, , '' ,
)*,( !与先心病的关系尚无定论.用分子生物
学方法对 等病原体基因从先心病的靶器官心脏
组织中进行病原感染调查尚未见报道,本研究采用
+及+ +法进行各病原基因的检测.调查表
明,从单因素分析可见 , )*,+ 在先心病组与
对照组间差异有显著性( <";" ),提示 , )*,
+ 为先心病发病的重要危险因子,而 '' 与( !
% 中华微生物学和免疫学杂志!"""年第!"卷第!期 7'' 5- 5,'' !""", 5!",/ 8!
则无统计学意义( ).国内曾有关于 ,
与先心病发病相关的报道〔 , 〕.尽管本文中在
先心病病例组与对照组中 阳检率无统计学意
义( ),但其感染率高达 ,属 种病
原体之首,可见其具有广泛的感染性及重要的致病
机会. 是一种新型的性传播性疾病,近年来有
逐步上升的趋势.文献报道,母亲疱疹病毒感染可
引起胎儿中枢神经系统损害,尚未见到引起先心病
的报道.本研究中 在先心病中的阳检率仅为
,与对照组比较 ,说明 感染与
先心病无关.
我们仅作了 例先心病及 例对照的
,从单因素的 '' 确切概率分析可以很
好地从病毒基因的分子水平来反映 感染与先心
病发病有关( ),但作为多因素分析,由于
部分资料的欠缺,故予以剔除.对 , , ,
的多因素 !" # $分析显示, , 在多因素
中均与先心病有较高的相关性,而 的作用强度
更大,其 值为 ,而 的 值为 ,
与 在先心病的发病中作用较小, 值仅
为 和 .
对已知先心病的心脏组织进行直接病原基因的
调查,从分子水平在先心病心脏组织中检测到 ,
, , 和 病原基因,为先心病致畸基
因的调控理论研究提供了客观依据.
参考文献
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王晓明,韩美玉,张国成,等,巢式 检测先天性心脏病心脏石
蜡标本中 病毒的感染,第四军医大学学报, , :
,
刘正乐,康胜方,朝敏,等,先天性心脏病与弓形虫感染的关系,
中华医学杂志, , : ,
(收稿日期: )
中华微生物学和免疫学杂志 年第 卷第 期 ''5 $ !+ ! 811%''! , & $ , ! ,-!,
395114
·上一篇：先天性心脏病并发肺动脉高压
·下一篇：学童先天性心脏病的防治现况
王晓明张国成韩美玉许东亮
【摘要】目的探讨人微小病毒 ( ),弓形体( , ),风疹病毒
( , ),巨细胞病毒( , )和单纯疱疹病毒 型(
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对照组% 例系非先天畸形心脏组织标本,其中
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病原: 病毒质粒由沙特皇家医院研究中心提
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