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尘螨变应原的免疫印渍法分析
陈文恕 饕矸书 温廷桓 朱运松. 顾天爵.
(上惫医斟大学寄生虫学教研塞,土海)
中国免壶学杂志【989年幕5眷第4期
【摘要] 尽管粉尘螨浸液中的许多蛋白具有变应原性,但进一步甩免疫印渍法分析,它们又分成
若干鳇和哮喘患者的IglE站台的较小组分,这些组分是异质的并显示出不同的图谱.与皮肤搞刺试验,EL-
ISA比较:免疫印溃法中IgE抗F-和皮肤搞刺试验阳性,阳性符台率达9l ,免疫印渍法和ELISA法MIgE
结果在统计上显著相关【r=0.7029 p0.05.三
组均值之问有显著性差异,P<0.01 C见表
1). 表1 螨蛋白对l9倒尘螨过敏患者的瘦肤撬和
试验结果
风团面积
琦值(cm 2)O.202 O.204 0.so8 0.95 0.52 4 0.538 0.566
二,免疫印渍法鉴定名螨蛋白中IgE反
应的组分抗原2 P,4 P,6 P,8 P,
11P,D,经SDS-PAGE(3.4～2O 线性
梯度)电转移至纤维滤膜上,再经l患者血
清(皮试Df阳性,ELISA测血清总IgE量
为50303国际单位,螨特异性IgE相对值为
1.090 D)和HRop,抗人IgE免疫染色后,探
测到有6种IgE反应的纽分,从2 P那儿P
都有2种或2种以上活性纽分.按电泳迁移
率从大到小依次命名为F-～F6.显色较深的
是F.和F3.各螨蛋白所含的IgE反应组分各
不相同,其中8 P,6 P所含的组分最多,
而8 P显色最深,其IgE反应最强(含有FI
～F5 5个成分),见图l,图2.正常人血
清作对照,免疫印溃法后仅见6 P上有3条
很弱色带(未显示).每孔加3.6 g蛋白量.
围2 纤维滤硅&IgE反应的蜡蛋白组分薄层扫描(扫描波
长~30 nm.参比硅长6'0 nm)
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讨 论
世界上一些学者,如Heymann-~,认为
尘螨有主要变应原,并且梅主要变应原纯化
后继续研究其性质 .又有一些学者,如
T0vey等,用印渍法说明尘螨变应原有20多
种之多,没有什么主要变应原 0'.我们通
过尘螨样品预先分离并进行化学处理,使其
分解成为小分子物质,再用免疫印渍法表明:
某些不同分子量的螨变应原中存在着具有相
同分子量和电泳率的变应原性质的组分.这
些组分的数目是有限的几种(本实验显示出
6种).这几种组分可能经不同的方式聚台,
或与载体相连,或单独存在等,形成了众多
的不同分子量的变应原.这几种组分是同质
的还是异质的 本文又通过24倒吸入型哮喘
患者对Ft～F 的[gE反应,发现其中任何2
种组分反应不相连锁.这可能表明;5种组
分是异磺的,可能它们的变应原决定簇是不
同的.本文将免疫印渍法和皮试,ELIsA法
结果进行了比较,表明了免疫印渍法作为一
个有效研究工具,可应用于变态反应的基础
和临床.同时还指示:组分F1是尘螨过敏哮
喘患者共同反应的主要变应原组分.其纯化
后,可望作为诊断试剂的标准品和免疫治疗
的纯化翻剂. 参考文献
1.耻贯一主稿.藏开病学(下噩).北京:^岛卫生&' 触
1980;442.
2.Romag~ni S-eI a】I n c A rchs A】I e rgY APP]
1IT]mu1976;50 1 525. -
3.Ba】do BA.Corlt01111D Top Mo Im rD.unoli981:8'4
4.Ti)w 1,1 H,e c.a】.proc Nat Acad Sci USA1979;
76:4350.
5.蘑_恚康.等.中华★生靠学和免瘦学素毒1986:6 c6):
336
6.许I=I平,荨.中
7.来运槛,荨.生钧化学与生物钧曼进晨1984i(5)
8.蒜文魁.皖南医学赛学报1987;6(j)t 282.
l94.
;56.
9.Heymann P,eI a】.J AII e rgy CIi n Immu舯I
Ig肺:丌:129.
10,Tovey ER,Baldo BA 1nt A rc A】【ergy
Appl Immunl~85; 6l 82.
[1987年6月收蔫.10糖年l2月●目3
(编辑孙志敷)
(上接233页)的关系.
(奉文所用DR位点纯台子纳胞由北京儿科研究昕临床
白蛔臆室提供.特此囊封)
参考文献
i.IBodrae r WF,et aI B I WHO(i n press).
2.Chat r0n DJ.McDevi tt HO.I Exp Med1980
152:18.
3一orlo$PP J Exp Mod1977;146:1261.
4.Ti eber VL,eI a1.J Biol Chem1986:261: 3吕.
5.Rosen-BrOll~on&et aI.Hi 3IocomPa!iblIit7
Te3Ii1181984,Spfi nB -Vcr】i n Heidel berg, I—
ber c ED,0t aI I9 .
6.井遗平.等.中日友好置院学报l9髓;2;2.
.Nepom BS,el i1.Proc NatI Acad ScI USA.19
83 8Ol曲船. [1988年10 收藕) (编辑 关术昌)
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(上惫医斟大学寄生虫学教研塞,土海)
中国免壶学杂志【989年幕5眷第4期
【摘要] 尽管粉尘螨浸液中的许多蛋白具有变应原性,但进一步甩免疫印渍法分析,它们又分成
若干鳇和哮喘患者的IglE站台的较小组分,这些组分是异质的并显示出不同的图谱.与皮肤搞刺试验,EL-
ISA比较:免疫印溃法中IgE抗F-和皮肤搞刺试验阳性,阳性符台率达9l ,免疫印渍法和ELISA法MIgE
结果在统计上显著相关【r=0.7029 p0.05.三
组均值之问有显著性差异,P<0.01 C见表
1). 表1 螨蛋白对l9倒尘螨过敏患者的瘦肤撬和
试验结果
风团面积
琦值(cm 2)O.202 O.204 0.so8 0.95 0.52 4 0.538 0.566
二,免疫印渍法鉴定名螨蛋白中IgE反
应的组分抗原2 P,4 P,6 P,8 P,
11P,D,经SDS-PAGE(3.4～2O 线性
梯度)电转移至纤维滤膜上,再经l患者血
清(皮试Df阳性,ELISA测血清总IgE量
为50303国际单位,螨特异性IgE相对值为
1.090 D)和HRop,抗人IgE免疫染色后,探
测到有6种IgE反应的纽分,从2 P那儿P
都有2种或2种以上活性纽分.按电泳迁移
率从大到小依次命名为F-～F6.显色较深的
是F.和F3.各螨蛋白所含的IgE反应组分各
不相同,其中8 P,6 P所含的组分最多,
而8 P显色最深,其IgE反应最强(含有FI
～F5 5个成分),见图l,图2.正常人血
清作对照,免疫印溃法后仅见6 P上有3条
很弱色带(未显示).每孔加3.6 g蛋白量.
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世界上一些学者,如Heymann-~,认为
尘螨有主要变应原,并且梅主要变应原纯化
后继续研究其性质 .又有一些学者,如
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种之多,没有什么主要变应原 0'.我们通
过尘螨样品预先分离并进行化学处理,使其
分解成为小分子物质,再用免疫印渍法表明:
某些不同分子量的螨变应原中存在着具有相
同分子量和电泳率的变应原性质的组分.这
些组分的数目是有限的几种(本实验显示出
6种).这几种组分可能经不同的方式聚台,
或与载体相连,或单独存在等,形成了众多
的不同分子量的变应原.这几种组分是同质
的还是异质的 本文又通过24倒吸入型哮喘
患者对Ft～F 的[gE反应,发现其中任何2
种组分反应不相连锁.这可能表明;5种组
分是异磺的,可能它们的变应原决定簇是不
同的.本文将免疫印渍法和皮试,ELIsA法
结果进行了比较,表明了免疫印渍法作为一
个有效研究工具,可应用于变态反应的基础
和临床.同时还指示:组分F1是尘螨过敏哮
喘患者共同反应的主要变应原组分.其纯化
后,可望作为诊断试剂的标准品和免疫治疗
的纯化翻剂. 参考文献
1.耻贯一主稿.藏开病学(下噩).北京:^岛卫生&' 触
1980;442.
2.Romag~ni S-eI a】I n c A rchs A】I e rgY APP]
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3.Ba】do BA.Corlt01111D Top Mo Im rD.unoli981:8'4
4.Ti)w 1,1 H,e c.a】.proc Nat Acad Sci USA1979;
76:4350.
5.蘑_恚康.等.中华★生靠学和免瘦学素毒1986:6 c6):
336
6.许I=I平,荨.中
7.来运槛,荨.生钧化学与生物钧曼进晨1984i(5)
8.蒜文魁.皖南医学赛学报1987;6(j)t 282.
l94.
;56.
9.Heymann P,eI a】.J AII e rgy CIi n Immu舯I
Ig肺:丌:129.
10,Tovey ER,Baldo BA 1nt A rc A】【ergy
Appl Immunl~85; 6l 82.
[1987年6月收蔫.10糖年l2月●目3
(编辑孙志敷)
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(奉文所用DR位点纯台子纳胞由北京儿科研究昕临床
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参考文献
i.IBodrae r WF,et aI B I WHO(i n press).
2.Chat r0n DJ.McDevi tt HO.I Exp Med1980
152:18.
3一orlo$PP J Exp Mod1977;146:1261.
4.Ti eber VL,eI a1.J Biol Chem1986:261: 3吕.
5.Rosen-BrOll~on&et aI.Hi 3IocomPa!iblIit7
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6.井遗平.等.中日友好置院学报l9髓;2;2.
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