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第七节 传染性鼻炎
传染性鼻炎是由鸡副嗜血杆菌(Haemophilus parogallinarum)引起的鸡的急性呼吸道传染病,在临床上以鼻腔与鼻窦发炎,流水样鼻涕,流泪,面部肿胀为特征.
第五章 家禽的主要传染病
[病 原]
鸡副嗜血杆菌为一种G—两极着色,特别是从病鸡窦分泌物检出时.无运动性,1.菌菌的形态随培养时间不同而变化:培养24小时时呈短杆,并带有成丝倾向,48-60小时则发生退化,出现碎片和不整形态.此菌可出现单个,成对或形成短链,新分离的有毒力菌株具有荚膜.
本菌在普通培养基不能生长,需要V因子的培养基,V因子是不耐热成份即NAD(辅酶I).存在于红血球中和血清中酵母膏中含量丰富,葡萄球菌亦产生.血清中含有抑制抗体和核苷酸没,如制成巧克力琼脂(70℃,30分)可将上述物质破坏."卫星现象"是该病原菌的重要特征,在5-10%CO2存在条件下,37℃生长良好,形成直径0.3mm左右,园形隆起,边缘整齐,灰白色丰透明,带光泽的露滴样菌落,培养初期的菌落湿润,有明显的荧光,有荚膜,称为粘液变种M,长时间培养,则荧光消失,荚膜失去,这称为粗糙变种R.
生化:用标准培养基进行,发酵果糖,葡萄糖,甘露糖,不发酵海藻糖,半乳糖.
[流行病学]
1月龄 以上鸡易感感,病鸡(慢性)和带菌鸡(健康)是本病的主要储存宿主,本病的传播可通过与病鸡接触或以气源感染,但主要是经饲料,饮水传播,特别是饮水,病原菌随鼻液和泪水排出,故本病流行的速度快,在初感染群,呈爆发性,以实验感染例:症状恢复后10日左右停止排菌,但和霉形体等合并发病的鸡经月余仍排菌,初生雏带菌的,有的近二个月,本病全年均可发生,但以入冬和春初霉雨季节多发.
[临床症状]
潜伏期1-3天.
最显著的症状是:流鼻涕,流泪,面部水肿,发生下呼吸道感染时引起罗音,部分鸡尚引起腹泻,此外,公鸡肉髯,母鸡的下颌部分分别可见浮肿性肿胀,母鸡产蛋量下降至停止.据日本学者统计:100%的病例出现流鼻涕,面肿,70%有流泪,56%有下痢,30%排绿便,30%有呼吸杂音和异常,15%见有肉垂和喉头肿胀.
病程依鸡的日龄,购买条件和和菌株的毒力而异,通常经2周左右,症状有消失即恢复,不发生死亡,但在野外由于其它菌毒的继发感染病程变长,预后各不相同.
[病变]
鼻腔,窦粘膜呈急性卡他性炎,粘膜充血肿胀,表面盖有大量粘液,窦内有渗出物凝块,后成为干酪样坏死物,常见有卡他性结膜炎,结膜充血肿胀,脸部及内髯皮下水肿,还见有肺炎和气囊炎.
[诊断]
本病需与慢性呼吸道病,慢性禽霍乱,禽痘和VitA缺乏症相区别,特别是注意并发感染.
1.病原分离鉴定:用无菌棉拭子采自急性期病鸡2~3只,从窦腔内,气管,气囊采病料,直接在血液琼脂上划线,然后用葡萄球菌划横线,点燃蜡烛即盖上广口瓶,37℃培养.如果经24-48小时后能发现G—卫星样生长杆菌,且过氧化氢酶阴性,在血液或鸡血清肉汤琼脂上生长而在普通琼脂上不生长的话,则进一步做生化试验和血液学鉴定.
实际工作中,很少采集鼻汁作为培养材料,主要是虽含菌多,但污染(杂菌)也较严重,有人认为血中正常抗体有抑菌作用及核苷酸分解酶使培养基中的V因子分解,生长效果往往不理想,因此加入血后应放70℃保持30分钟,以灭活其中酶和抗体,制成巧克力琼脂培养基,可以得到较好的分离培养结果,但据中监所资料,以鸡血清鸡肉汤,琼脂效果最佳.
另一有效方法是人工感染试验,可用窦内分泌物或培养物作接种材料,眶下窦内接种2-3只鸡,在1-2天出现病状.
2.血清学诊断:常用的血清学实验包括平板试管凝集,AGP(琼脂凝胶沉淀),HI.
(1)血清平板凝集反应:制备抗原用培养基可用固体/液体培养基,均于37℃培养,前者在CO2条件下培养16～18小时,用生理盐水或PH7.2的PBS将菌体洗下,离心洗涤3次,再悬浮于含0.01%硫柳汞的生理盐水中,使浓度为麦氏比浊管第2管的10倍,用液体(如鸡血清鸡肉汤)培养基,在常规条件下培养18-20小时,离心集菌的方法同前.
操作:在玻片上滴加供试血清和抗原各一滴(0.05ml)3分钟内出现明显凝集颗粒的判为阳性,本反应宜在20～25℃条件下进行.
(2)试管凝集:抗原是将上述用抗原再用0.01%硫柳汞生理盐水作10倍稀释,血清从5倍开始作倍比稀释(各管0.25ml)加入等量抗原,充分混合后置37℃2小时,再在5℃静置18～20小时作判定,有明显凝集的血清最终稀释度作为凝集价,效价在1:5稀释即为阳性.
另加强试验敏感性,代表所有血清型的复合抗原推荐作为凝集试验用,某些制剂可能出现自凝或不凝集,可分别用胰蛋白酶和透明质酸酶处理而得到满意效果,最近Yamaguchi et al还将多糖抗原吸附于乳胶凝集颗粒上,创建了一种血清型特异性凝集试验.
(3)琼扩(AGPT):可用凝集抗原进行,但用相当于凝集抗原浓度5倍的菌液,经超声处理,用其离心的上清进行则效果更好,反应用8%Nacl的1%琼脂胶,孔距3-4mm,37℃,3日后判定.
(4)血球凝集和HI:鸡红血球离心洗涤3次,(1500rpm10'),用生理盐水制备0.5%血球液,血清和抗原均用生理盐水稀释,抗原从5倍作对倍稀释(每管0.4ml),加入等量红血球液,静置室温40-50分,将凝集价作为一个抗原单位.HI时,血清从5倍作对倍稀释(每管0.2ml),加抗原0.2ml(4u),作用10～15分,加入0.4ml红血球液,混合待红血球下沉后作判定(40～50分),血凝抑制的血清最高稀释倍数为HI价,HI价在5倍以上为阳性.
本反应宜在于20～25℃下进行,若温度过高,管底沉淀物易破裂.本反应还能查出卵黄抗体,方法是将卵黄用生理盐水稀释2.5倍,再加入等量氯仿,强力振荡后以3000rpm离心10分,其上清即为卵黄的5倍稀释液.HI抗体出现较前二种抗体晚,但具有血清型特异性,与免疫保护力紧密相关.HI反应仅能用于A型菌感染鸡的诊断,对于C型菌株疫苗保护力评价,可用间接血凝方法进行,其它血清学试验有:补反,间接血凝,直接荧光抗体试验.
[综合防制技术]
在美国加利福尼亚南部多应用红霉素,土霉素.已证明治疗有效的药物是:磺胺二甲嘧啶,双氢链霉素和一些磺胺药组合可起到协同作用,在治疗发病鸡同时,以全群为对象,可将药物混入饮水或饮料中投予,进行预防性治疗.
预防:①一般措施:新引进雏鸡,至少要观察10日,加强饲养卫生管理,尤为通风换气,避免密集饲养,发生本病,要停止育雏或引起入新雏,病鸡舍须腾空消毒,7天以后才能引进新鸡群,②免疫法:在日本广泛使用肉汤菌苗(死苗),用Al(OH)3吸附制成,接种鸡如发病,症状也轻,恢复快,减少经济损失,有效期9月.还不能达到100%保护.另一种就是鸡胚苗(含2-3个血清型,或自源性),用福尔马林灭活,添加佐剂,稳定剂等,在自然发病前2～3周注射(皮下),10～20周龄鸡可产生最好效果.
联苗:传染性支气管炎,新城疫,传染性鼻炎三联苗.但是传染性鼻炎与鸡败血霉形体联苗经皮下接种能保护鸡免患一过性,慢性鼻炎,肌肉接种该联苗,鸡对会嗜血杆菌的抗体应答受到抑制.③流行地区实行有控制的暴露,即在15～18周龄时对鸡作免疫接种,在20周龄时暴露于活菌,由于不同血清型可能在交叉保护上有差异,所以应用已知特征的自源菌或分离株.此期间应避免活毒的疫苗接种,个别反应严重症状鸡可注射抗菌素.
再 见!
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传染性鼻炎是由鸡副嗜血杆菌(Haemophilus parogallinarum)引起的鸡的急性呼吸道传染病,在临床上以鼻腔与鼻窦发炎,流水样鼻涕,流泪,面部肿胀为特征.
第五章 家禽的主要传染病
[病 原]
鸡副嗜血杆菌为一种G—两极着色,特别是从病鸡窦分泌物检出时.无运动性,1.菌菌的形态随培养时间不同而变化:培养24小时时呈短杆,并带有成丝倾向,48-60小时则发生退化,出现碎片和不整形态.此菌可出现单个,成对或形成短链,新分离的有毒力菌株具有荚膜.
本菌在普通培养基不能生长,需要V因子的培养基,V因子是不耐热成份即NAD(辅酶I).存在于红血球中和血清中酵母膏中含量丰富,葡萄球菌亦产生.血清中含有抑制抗体和核苷酸没,如制成巧克力琼脂(70℃,30分)可将上述物质破坏."卫星现象"是该病原菌的重要特征,在5-10%CO2存在条件下,37℃生长良好,形成直径0.3mm左右,园形隆起,边缘整齐,灰白色丰透明,带光泽的露滴样菌落,培养初期的菌落湿润,有明显的荧光,有荚膜,称为粘液变种M,长时间培养,则荧光消失,荚膜失去,这称为粗糙变种R.
生化:用标准培养基进行,发酵果糖,葡萄糖,甘露糖,不发酵海藻糖,半乳糖.
[流行病学]
1月龄 以上鸡易感感,病鸡(慢性)和带菌鸡(健康)是本病的主要储存宿主,本病的传播可通过与病鸡接触或以气源感染,但主要是经饲料,饮水传播,特别是饮水,病原菌随鼻液和泪水排出,故本病流行的速度快,在初感染群,呈爆发性,以实验感染例:症状恢复后10日左右停止排菌,但和霉形体等合并发病的鸡经月余仍排菌,初生雏带菌的,有的近二个月,本病全年均可发生,但以入冬和春初霉雨季节多发.
[临床症状]
潜伏期1-3天.
最显著的症状是:流鼻涕,流泪,面部水肿,发生下呼吸道感染时引起罗音,部分鸡尚引起腹泻,此外,公鸡肉髯,母鸡的下颌部分分别可见浮肿性肿胀,母鸡产蛋量下降至停止.据日本学者统计:100%的病例出现流鼻涕,面肿,70%有流泪,56%有下痢,30%排绿便,30%有呼吸杂音和异常,15%见有肉垂和喉头肿胀.
病程依鸡的日龄,购买条件和和菌株的毒力而异,通常经2周左右,症状有消失即恢复,不发生死亡,但在野外由于其它菌毒的继发感染病程变长,预后各不相同.
[病变]
鼻腔,窦粘膜呈急性卡他性炎,粘膜充血肿胀,表面盖有大量粘液,窦内有渗出物凝块,后成为干酪样坏死物,常见有卡他性结膜炎,结膜充血肿胀,脸部及内髯皮下水肿,还见有肺炎和气囊炎.
[诊断]
本病需与慢性呼吸道病,慢性禽霍乱,禽痘和VitA缺乏症相区别,特别是注意并发感染.
1.病原分离鉴定:用无菌棉拭子采自急性期病鸡2~3只,从窦腔内,气管,气囊采病料,直接在血液琼脂上划线,然后用葡萄球菌划横线,点燃蜡烛即盖上广口瓶,37℃培养.如果经24-48小时后能发现G—卫星样生长杆菌,且过氧化氢酶阴性,在血液或鸡血清肉汤琼脂上生长而在普通琼脂上不生长的话,则进一步做生化试验和血液学鉴定.
实际工作中,很少采集鼻汁作为培养材料,主要是虽含菌多,但污染(杂菌)也较严重,有人认为血中正常抗体有抑菌作用及核苷酸分解酶使培养基中的V因子分解,生长效果往往不理想,因此加入血后应放70℃保持30分钟,以灭活其中酶和抗体,制成巧克力琼脂培养基,可以得到较好的分离培养结果,但据中监所资料,以鸡血清鸡肉汤,琼脂效果最佳.
另一有效方法是人工感染试验,可用窦内分泌物或培养物作接种材料,眶下窦内接种2-3只鸡,在1-2天出现病状.
2.血清学诊断:常用的血清学实验包括平板试管凝集,AGP(琼脂凝胶沉淀),HI.
(1)血清平板凝集反应:制备抗原用培养基可用固体/液体培养基,均于37℃培养,前者在CO2条件下培养16～18小时,用生理盐水或PH7.2的PBS将菌体洗下,离心洗涤3次,再悬浮于含0.01%硫柳汞的生理盐水中,使浓度为麦氏比浊管第2管的10倍,用液体(如鸡血清鸡肉汤)培养基,在常规条件下培养18-20小时,离心集菌的方法同前.
操作:在玻片上滴加供试血清和抗原各一滴(0.05ml)3分钟内出现明显凝集颗粒的判为阳性,本反应宜在20～25℃条件下进行.
(2)试管凝集:抗原是将上述用抗原再用0.01%硫柳汞生理盐水作10倍稀释,血清从5倍开始作倍比稀释(各管0.25ml)加入等量抗原,充分混合后置37℃2小时,再在5℃静置18～20小时作判定,有明显凝集的血清最终稀释度作为凝集价,效价在1:5稀释即为阳性.
另加强试验敏感性,代表所有血清型的复合抗原推荐作为凝集试验用,某些制剂可能出现自凝或不凝集,可分别用胰蛋白酶和透明质酸酶处理而得到满意效果,最近Yamaguchi et al还将多糖抗原吸附于乳胶凝集颗粒上,创建了一种血清型特异性凝集试验.
(3)琼扩(AGPT):可用凝集抗原进行,但用相当于凝集抗原浓度5倍的菌液,经超声处理,用其离心的上清进行则效果更好,反应用8%Nacl的1%琼脂胶,孔距3-4mm,37℃,3日后判定.
(4)血球凝集和HI:鸡红血球离心洗涤3次,(1500rpm10'),用生理盐水制备0.5%血球液,血清和抗原均用生理盐水稀释,抗原从5倍作对倍稀释(每管0.4ml),加入等量红血球液,静置室温40-50分,将凝集价作为一个抗原单位.HI时,血清从5倍作对倍稀释(每管0.2ml),加抗原0.2ml(4u),作用10～15分,加入0.4ml红血球液,混合待红血球下沉后作判定(40～50分),血凝抑制的血清最高稀释倍数为HI价,HI价在5倍以上为阳性.
本反应宜在于20～25℃下进行,若温度过高,管底沉淀物易破裂.本反应还能查出卵黄抗体,方法是将卵黄用生理盐水稀释2.5倍,再加入等量氯仿,强力振荡后以3000rpm离心10分,其上清即为卵黄的5倍稀释液.HI抗体出现较前二种抗体晚,但具有血清型特异性,与免疫保护力紧密相关.HI反应仅能用于A型菌感染鸡的诊断,对于C型菌株疫苗保护力评价,可用间接血凝方法进行,其它血清学试验有:补反,间接血凝,直接荧光抗体试验.
[综合防制技术]
在美国加利福尼亚南部多应用红霉素,土霉素.已证明治疗有效的药物是:磺胺二甲嘧啶,双氢链霉素和一些磺胺药组合可起到协同作用,在治疗发病鸡同时,以全群为对象,可将药物混入饮水或饮料中投予,进行预防性治疗.
预防:①一般措施:新引进雏鸡,至少要观察10日,加强饲养卫生管理,尤为通风换气,避免密集饲养,发生本病,要停止育雏或引起入新雏,病鸡舍须腾空消毒,7天以后才能引进新鸡群,②免疫法:在日本广泛使用肉汤菌苗(死苗),用Al(OH)3吸附制成,接种鸡如发病,症状也轻,恢复快,减少经济损失,有效期9月.还不能达到100%保护.另一种就是鸡胚苗(含2-3个血清型,或自源性),用福尔马林灭活,添加佐剂,稳定剂等,在自然发病前2～3周注射(皮下),10～20周龄鸡可产生最好效果.
联苗:传染性支气管炎,新城疫,传染性鼻炎三联苗.但是传染性鼻炎与鸡败血霉形体联苗经皮下接种能保护鸡免患一过性,慢性鼻炎,肌肉接种该联苗,鸡对会嗜血杆菌的抗体应答受到抑制.③流行地区实行有控制的暴露,即在15～18周龄时对鸡作免疫接种,在20周龄时暴露于活菌,由于不同血清型可能在交叉保护上有差异,所以应用已知特征的自源菌或分离株.此期间应避免活毒的疫苗接种,个别反应严重症状鸡可注射抗菌素.
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