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法医学实验指导
(医事法律专业用)
主编:肖纯 隋燕霞
江 西 中 医 学 院
2005-3
法医学实验指导
主编: 肖 纯
隋燕霞
编者 (以姓氏笔画为序)
乔玉丹 肖 纯 周志愉 施 旻 隋燕霞
导 言
[实验目的]
法医学实验是教学的重要内容之一,通过实验教学对学生进行"基本理论,基本知识,基本技能"三大基础训练,是实现综合素质与思维创新能力培养的重要途径与手段,它在教学过程中占有极重要的地位.为此,实验应达到以下目的:
1,培养学生应用所学理论,解决实际问题和独立工作的能力.
2,通过实验,学会发现,固定,采取痕迹物证的主要方法,了解刑事技术鉴定的理论根据和基本途径.
3,培养学生严谨的科学态度,严格认真,实事求是的工作作风.
[实验组织与遵守]
l,实验小组4-6人组成,实验时分工操作:记录,检验等不同的工作.
2,实验前应按实验大纲的要求,完成课前必要的准备工作后,方能参加实验.
3,实验课进行期间,使用室内的设备仪器应严格遵守使用规定.
4,实验进行中仪器发生故障,应立即报告指导教师,不允许擅自拆卸仪器.
5,注意安全,防止事故.在未经检查或不熟悉电路前不可接通电源,使用中万一出现电路故障,应迅速切断电源.
6,爱护仪器设备,节约用材.
7,实验结束后,将用具整理就绪,所用器械擦洗干净, 并清点用具设备,如数交回负责老师.如有损坏(或丢失),应按规定负责赔偿.
8,整理实验记录,作出实验结论,写出实验报告按时交老师评阅.
9,实验结束后应搞好卫生,关闭电源,水源,方能离开实验室.
实验指导目录
实验一 死亡与尸体现象
实验二 机械性损伤
一,钝器伤实验
二,锐器伤实验
实验三 物理性损伤
烧死实验
实验四 机械性窒息
一,缢死与勒死实验
二,扼死与闷死实验
三,溺死实验
实验五 有机磷农药中毒实验
实验六 血痕检验
一,血痕的预备试验
二,血痕的确证试验
三,血的ABO血型测定
四,血痕的种属试验
实验七 精斑检验
一,精斑的预试验
二,精斑的确证试验
三,精斑的血型测定
实验八 唾液斑检验
唾液斑的证明试验
实验九 毛发检验
一,毛发的基本形态观察
二,人毛与兽毛的鉴别
三,人毛发的血型测定
实验十 骨骼检验
一,人类骨骼的组成
二,人骨与兽骨的鉴别
三,人骨的血型测定
四,人骨的性别检查
实验一 死亡与尸体现象
一,实验目的
了解死亡的发生与发展及死亡后尸体发生变化的过程,熟悉各种尸体在变化过程中表现出来的各种现象及所需要的时间,初步掌握法医实践中常用推断死亡时间的方法.
二,实验内容
1.观察动物死亡过程,记录死亡时间及表现.
2.观察动物尸体现象,记录尸体现象出现的时间.
3.观看尸检录象,观察尸体现象及尸检过程.
三,实验器材
动物实验器材:活兔1只,10ml, 2ml注射器各1支 ,剪刀1把,镊子1把,棉球或纱布适量,动物固定架1个,20cm直尺1把,方盘1个,温度计1支,7%硫代硫酸钠溶液500ml,新福林滴眼液1支,匹罗卡品滴眼液1支,电流刺激仪1台.
四,实验方式
动物实验,分组操作,观察
观察尸体
观看尸检录相
五,实验方法
(一)动物实验
动物的准备:
实验前一天,脱去兔毛.将活兔固定在固定架上,先将较长的兔毛用剪刀剪短,戴上橡胶手套,用镊子夹棉球或纱布块蘸取7%硫代硫酸钠溶液擦在剪过毛的兔子身上,数分钟后兔毛变软液化成糊状,随后用纱布块轻擦并用清水冲洗干净.
分组动物实验
处死兔子,记录死亡发生过程及其表现.先给脱毛后的兔子测体温,记录在尸温记录表上,然后将兔子处死.处死的方法是:用注射器抽取5-10 ml 空气注入兔耳缘静脉,使兔子空气栓塞死亡,同时记录注射空气的时间.频死期时的主要表现为呼吸心跳功能发生紊乱,肢体及呼吸肌痉挛,随后呼吸心跳停止而进入临床死亡期,出现尸冷,尸斑,尸僵等现象,进入生物学死亡期.
观察动物死亡发生过程,记录的内容见表1
表1死亡发生过程及表现情况记录表
第 组
实验时间
实验动物
实验方式: 注射量: 注射时间:
致死环境温度:
死亡表现及时间:
时 分至 时 分呼吸紊乱
时 分至 时 分心率紊乱
时 分至 时 分肢体痉挛
时 分呼吸停止
时 分心跳停止
时 分瞳孔散大
时 分瞳孔缩小
时 分尸冷发生
时 分尸僵出现
时 分尸斑出现
2,观察记录尸体现象.将观察到的尸体现象填入到表2
表2 尸体现象记录表
第 组 死亡时间: 年 月 日 时 分
时间(分)
15 30 45
15 30 45
15 30 45
气温℃
尸温℃
温度%
肌肉超生反应
瞳孔超生反应
肌肉松弛
尸僵
尸斑
角膜混浊
说明:
肌肉及瞳孔的超生反应用阳性(+),阴性(-)符号记录.
肌肉松弛用阴性符号记录,尸僵用阳性符号记录.
尸斑各期分别用"1","2","3"数字记录."1"代表坠积期,"2"代表扩散期,"3"代表浸润期.
角膜混浊程度分别用"1","2","3"数字记录."1"代表轻度混浊,"2"代表中度混浊,"3"代表高度混浊.
具体观察内容及操作方法如下:
(1)肌肉超生反应实验
操作方法:用针或木棒刺激,敲打腿部肌肉,或用电流刺激腿部肌肉.
反应现象:肌肉出现收缩,局部肌肉隆起(呈阳性反应),肌肉不隆起(呈阴性反应)
记录反应时间:30分钟记录一次,一直记录至呈现阴性反应为止.
(2)瞳孔超生反应实验
操作方法:如实验前瞳孔相对是大的,用新福林注入结膜囊;如实验前瞳孔相对是小的,用匹罗卡品滴入或注入结膜囊.
反应表现:新福林使虹膜松弛而瞳孔散大,匹罗卡品使虹膜收缩而瞳孔缩小.
瞳孔有散大或缩小的为阳性反应,没有的为阴性反应.
记录反应时间:死后4小时内进行此项实验.该项实验只能做一次,因为扩瞳与缩瞳药物作用时间可持续12-24小时.
(3)尸冷
尸冷的测量方法:用温度计插入直肠内5-7cm,观察5分钟,15分钟记录一次.
(4)肌肉松弛
观察方法:用手握住尸体的前肢或后肢做屈伸动作.关节活动无阻力,即为肌
肉松弛现象.
记录肌肉松弛的持续时间:15分钟记录一次,一直记录到尸僵出现.
(5)尸僵
观察方法:用手触摸肢体各关节,并做屈伸动作.
判断方法:只要某一关节屈伸出现障碍即为尸僵开始形成;各关节僵硬,固定不能屈伸为尸僵强硬;肌肉由僵硬转为软化,为尸僵缓解.
记录时间:15分钟记录一次,一直记录至尸僵完全缓解.
(6)尸斑
A,观察方法:用肉眼直接观察尸斑出现的部位,颜色及各期的表现.
B,判断方法:指压法判断.指压退色为坠积期,指压稍退色为扩散期,指压不退色为浸润期.
C,记录时间:15分钟记录一次,一直记录至浸润期出现.
(7)角膜混浊
A,观察方法:用肉眼直接观察角膜的混浊程度.
B,判断方法:能看清瞳孔为轻度混浊;能模糊地看到瞳孔轮廓为中度混浊;看不到瞳孔为高度混浊.
记录时间:15分钟记录一次,一直记录至高度混浊.
注意事项:
本项实验计划课时为2学时,但实际观察需要很长时间,因此除正课以外,要求学生要用课外时间观察,学生需克服困难,从实验一开始,观察,记录就不能中断,坚持到底.
(二)观看尸检录象
了解尸体检验的各个步骤和方法.
实验二 机械性损伤
一, 钝器伤实验
实验目的
通过本实验,理解钝器的的成伤原理,会用科学术语记录和描述损伤的组织形态特点,能够读懂法医学鉴定书,初步学会根据损伤的性状推断致伤物.
实验内容
观看常见钝器及常见钝器的成伤方式.
观察钝器伤的基本形态.
实验器材
1,棍棒,砖头,斧背,皮鞋底,白兔一只
2,人体标本(脑出血,脾破裂出血)骨折愈合切片
实验方式
动物实验
观察标本和切片
实验方法
(一)动物实验
1,致伤实验动物
用表面粗糙的砖头,木棍等,以切线方向擦,刮,蹭兔的体表面,形成
表皮剥脱.
用木棒,皮带,鞋底等,分别快速打击兔的背部,臀部和眼眶部,形成
皮下出血.
(3)用棍棒,斧锤背及其他不规则钝器打击兔体,分别形成挫伤和创.
2,观察损伤组织形态
观察步骤 观察致伤物的致伤部位及各种成伤方式,观察并记录致伤处损
伤组织的形态特点.
注意事项 由于软组织的损伤特征一般要经过一定的时间才能充分暴露出
来,故观察时要注意时间的掌握,尽可能在实验前(24小时)和实验课上分别推断致伤物,以形成新旧伤痕形态特点的对比,帮助理解生活反应现象.
(二)观察人体标本及切片
观察步骤
(1)首先判断所观察标本是何组织器官.如为成对的器官(肺,肾)要判明是哪一侧;如为部分组织器官(心,脑,肠)等,要判明它属于组织器官的哪一部分.
(2)判明是何组织器官后,按照由外向内,由上至下,从左到右的原则深入观察,以免遗漏.
①观察器官的大小,形状,颜色,表面特征.
②观察实质器官的切面应由外向内逐一进行,如肺的观察顺序为:胸膜—肺实质—气管—血管—肺门淋巴结.
③观察空腔器官应由内向外逐一进行,如心脏的观察顺序为:心腔及内容物—心内膜—心肌—冠状血管—心外膜等.
(3)在观察到该组织器官的损伤后,要利用所学的理论知识,根据其形态改变推断致伤物,设想成伤方式,联想发展及后果
注意事项
1,为了得到清晰,完整的损伤特征,观察应在致伤实验动物后的不同时间进行.
2,人体标本经福尔马林固定后,血液呈黑褐色,新鲜标本为红色,要注意区别.
3,观察人体标本时,注意轻拿轻放,观察时应双手拖住,不要倾斜或倒置或震荡,以免固定液流出,腐蚀手部,或固定液呈浑浊状,影响观察.
4,观察完标本,放回原处.
实验报告
根据具体的实验内容和实验方法,结合自己实际观察到的损伤情况.用科学术
语描述各损伤性状并归纳出法医学意义.
二, 锐器伤实验
实验目的
通过本实验,掌握锐器伤的形态特点,明确与锐器伤的主要鉴别点的区别,
初步学会根据损伤特点推断致伤物和判断受伤时间.
实验内容
观察案件中常见的锐器.
观察切,砍,刺,剪的成伤方式.
观察切创,砍创,刺创,剪创的性状.
实验器材
新鲜猪皮2块,菜刀,水果刀,三菱刮刀,双刃与单刃匕首,剪刀,斧刃等.
实验方式
模拟实验
实验方法
模拟制作锐器伤
(1)把两块新鲜猪皮,分别固定在10cm厚的高密度海绵上.
(2)根据锐器伤的主要成伤方式,用不同的锐器分别切,砍,刺,剪新鲜猪皮,制作成各种形态的切创,砍创,刺创,剪创.
2.观察损伤的组织
(1)比较,鉴别新鲜猪皮上的各种锐器创的形态特点.
(2)比对损伤形态与致伤物作用面形态.
(3)观察创口有无生活反应现象.
六,注意事项
要保管好各类致伤工具,以免误伤自己及同学.
七,实验报告
根据实验结果,指出锐器伤的基本形态及锐器创与钝器创的主要区别,比
较,鉴别锐器伤的四种成伤方式,损伤性状的异同点.
实验三 物理性损伤
烧死实验
实验目的
通过本实验,掌握烧死的尸体特征;明确鉴别生前烧死与死后焚尸的基本依据;
了解烧死的形成机理;明白法医对火场中的尸体进行检验,确定是生前烧死还是死后焚尸对确定案件性质均有十分重要的意义.
实验内容
观察烧死的特征
记录烧死与焚尸的不同现象.
实验器材
小白鼠或大白鼠,铁线,稻草,打火机,手术剪,手术刀,手术手套,镊子,
止血钳,托盘,纱布,尺子等
实验方式
动物实验
实验方法
致死实验动物
(1)取活的小鼠2只,将其中一只处死.
(2)取铁线一根,绑扎在另一只小鼠的后腿上.
(3)点燃稻草,等火着得很旺时,将死鼠放进火场中,同时将活鼠牵拉到火场的边缘处,并将活鼠在火场中来回牵走.
(4)根据火着得旺的程度添加稻草,以保证火的燃烧物有烟灰,碳末飞扬.
(5待活鼠停止跑动1-2分钟后,即把两只老鼠从火场中取出,并用水将火扑灭.
观察,记录尸体征象
将两只小鼠摆在托盘内,观察,记录尸体表面现象.
解剖动物
按常规的解剖方式,剥离舌根及喉周围组织,将舌连同喉,气管,食管,肺脏和心脏一起取出,然后取出肝,肾等内脏器官.
剪开食管,气管,支气管,切开内脏器官,观察,记录各自的现象特征.
注意事项
将小鼠致死5-10分钟后,再将其放进火场中焚烧.
必须让火场燃烧物有烟灰,碳末飞扬.
让活鼠在火场中加速呼吸,并来回牵走.
为避免烟灰,碳末的污染,先剪开食管检查,将手术剪用水冲洗后,再剪开气管,支气管检查.
七,实验报告
按要求写出实验报告
法医学实验报告
系 专业 学号 姓名 年 月 日
实验
名称
实验
目的
1,生前烧死
尸检
体验
表所 2,死后焚尸
面见
部位 生前烧死 死后焚尸
1,喉
尸
体 2,气管
解
剖 3,支气管
检
验 4,食管
所
见
5,肺脏
6,其他
结论
教师
评语
成绩
年 月 日
实验四 机械性窒息
一,缢死与勒死实验
实验目的
通过本实验,掌握机械性窒息尸体的一般征象,以及缢死与勒死的尸体征象特点;熟悉致死机制;了解压迫颈部所致机械性窒息死亡的过程.
实验内容
利用实验动物小鼠分别做缢死与勒死实验,观察尸体征象,并对缢死及勒死进行鉴别.
实验器材
实验动物小鼠,中等硬绳索2根,悬空动物用木架,解剖刀,镊子,剪子,手
套,解剖台等
实验方式
动物实验
实验方法:
缢死的操作方法
第一步,以前位将实验动物小鼠悬空缢死在木架上,并记录死亡时间.
第二步,对缢死的小鼠进行尸表检验及尸体解剖检验,观察并记录缢死的尸体
征象.
观察尸体外部征象.
颜面部窒息表现:颜面是否青紫,口唇是否发绀,双眼的球结膜,睑
结膜出血情况,舌尖是否露出齿外,以及咬伤出血情况.
颈部索沟:颈部索沟的位置,形状,走行,方向和深度.
其他:尿,便失禁情况,记录尸冷进程,剔毛观察尸斑.
观察尸体的内部征象
颈部:颈部肌肉出血情况,舌骨,甲状软骨等咽喉部骨骼骨折情况,
咽后壁出血情况,颈动脉内膜是否横裂.
血液:颜色,状态
内脏:有无充血,淤血现象,有无肺气肿,水肿情况,脑,脑膜淤血
情况.
勒死的操作方法.
第一步,将小鼠绑缚在动物解剖台上勒死,并记录死亡时间.
第二步,对勒死的小鼠进行尸表检验及尸体解剖检验,观察并记录勒死的尸体
征象.
(1)观察尸体外部征象.
①颜面部窒息表现:颜面是否青紫,口唇是否发绀,双眼的球结膜,睑结
膜出血情况,舌尖是否露出齿外,以及咬伤出血情况.
②颈部索沟:颈部索沟的位置,形状,走行,方向和深度.
③其他:尿,便失禁情况,记录尸冷进程,剔毛观察尸斑.
(2)观察尸体的内部征象
①颈部:颈部肌肉出血情况,舌骨,甲状软骨等咽喉部骨骼骨折情况,咽
后壁出血情况,颈动脉内膜是否横裂.
②血液:颜色,状态
③内脏:有无充血,淤血现象,有无肺气肿,水肿情况,脑,脑膜淤血情况.
分析总结
运用所学法医学相关知识,并根据动物实验所见,总结机械性窒息尸体的
一般尸体征象,知道如何鉴别缢死和勒死.
六, 注意事项
防止实验动物脱逃
防止动物咬伤人体
解剖时注意勿损伤手指或伤及他人
七, 实验报告
根据具体的实验结果,结合理论知识,写出实验动物的法医学检验
鉴定报告,分析,讨论死亡原因,并得出最终结论.
对缢沟和勒沟现象进行法医学鉴别,并将观察结果直接填入相应的
表格中.
缢沟和勒沟的鉴别记录表
系 专业 学号 姓名 年 月 日
项目
缢沟
勒沟
索沟位置
索沟方向
闭索
深度
肌肉出血
颈动脉内膜
骨折
二 闷死及扼死实验
一,实验目的
通过本实验,掌握闷死及扼死的尸体征象,进一步明确压迫颈部所致机械性窒息及堵塞性窒息尸体的一般征象,并对堵塞性窒息死及压迫性窒息死的窒息征象作出比较和鉴别;熟悉闷死及扼死的死亡性质及法医学鉴定要点;了解闷死及扼死的窒息过程及窒息机制.
二,实验内容
利用实验动物小鼠分别做扼死与闷死的模拟实验,观察尸体征象,并对扼死及闷死进行鉴别.
实验器材
实验动物小鼠,解剖刀,镊子,剪子,手套,毛巾,解剖台等
实验方式
动物实验
实验方法:
1,闷死的操作方法
第一步,将实验动物小鼠固定在解剖台上,持毛巾或较厚的纺织品将实验动物
口,鼻捂住至死亡,并记录死亡时间.
第二步,对闷死的小鼠进行尸表检验及尸体解剖检验,观察并记录闷死的尸体
征象.
(1)观察尸体外部征象.
①颜面部窒息表现:颜面是否青紫,口唇是否发绀,双眼的球结膜,睑结
膜出血情况,舌尖是否露出齿外,以及咬伤出血情况.
②其他:尿,便失禁情况,记录尸冷进程,剔毛观察尸斑.
(2)观察尸体的内部征象
①颈部:颈部肌肉出血情况,舌骨,甲状软骨等咽喉部骨骼骨折情况,咽
后壁出血情况,颈动脉内膜是否横裂.
②血液:颜色,状态
③内脏:有无充血,淤血现象,有无肺气肿,水肿情况,脑,脑膜淤血情况.
2,扼死的操作方法.
第一步,将小鼠绑缚在动物解剖台上用单手和双手分别扼压小鼠颈部直至死
亡,并记录死亡时间.
第二步,对扼死的小鼠进行尸表检验及尸体解剖检验,观察并记录扼死的尸体
征象.
(1)观察尸体外部征象.
①颜面部窒息表现:颜面是否青紫,口唇是否发绀,双眼的球结膜,睑结膜出血情况,舌尖是否露出齿外,以及咬伤出血情况.
②颈部扼痕:颈部扼痕的位置,形状,走行,方向和深度.
③其他:尿,便失禁情况,记录尸冷进程,剔毛观察尸斑.
(2)观察尸体的内部征象
①颈部:颈部肌肉出血情况,舌骨,甲状软骨等咽喉部骨骼骨折情况,咽后壁出血情况.
②血液:颜色,状态
③内脏:有无充血,淤血现象,有无肺气肿,水肿情况,脑,脑膜淤血情况.
(3)分析总结
运用所学法医学相关知识,并根据动物实验所见,总结闷死和扼死的尸体
特征,分析压迫性窒息及堵塞性窒息死亡在尸体上生活反应的差别.
六,注意事项.
1,防止实验动物脱逃
2,防止动物咬伤人体
3,解剖时注意勿损伤手指或伤及他人
七,实验报告
1,掌握扼死的法医学鉴定要点.
2,讨论,分析死亡原因,并对堵塞性窒息死及压迫性窒息死的窒息征象作出比较和鉴别,然后将结果直接填入表格
扼死的鉴定记录表
系 专业 学号 姓名 年 月 日
项目
扼死
颜面部
指压痕
指甲痕
颈部皮下及肌肉变化
颈部骨折
内脏
三 溺死实验
一,实验目的
通过本实验,掌握生前溺水和死后抛尸入水的区别要点,熟悉生前入水的尸体征象,了解溺死的死亡机理和死亡过程以及症状.
二,实验内容
1,将活的小鼠(大鼠或家兔)入水致死,观察其尸体征象.
2,将活的小鼠(大鼠或家兔)致死后入水,观察其尸体征象.
三,实验器材
1,带盖的大塑料桶或盆,装水并混有一些泥沙和水草或用大烧杯装水并加入少量活性炭.
2,锤子1把.
3,解剖器械(解剖刀片,解剖刀柄,医用剪刀,止血钳,镊子等.)
4,医用手套,纱手套
5,黑墨水或蓝墨水
四,实验方式
动物实验
五,实验方法
1,把塑料桶加水至1/2-2/3处,并放入一些泥沙和水草或活性炭,为了便于观
察,也可滴入几滴黑墨水或蓝墨水.
将一只小鼠致死后,放入大烧杯中(兔和大鼠则放入塑料桶中).
将另一只小鼠直接放入大烧杯中,等小鼠无力挣扎时,观察小鼠是否死亡
并记录时间.
将小鼠置于解剖台上,停留一段时间,然后分别将两只小鼠的毛剃光,观
察并记录尸体外部现象出现的时间和状态,观察并记录尸体外部现象出现的时间和状态,观察内容包括:
出现的时间,颜色.
口,鼻周围有无蕈样泡沫.
眼结膜下有无点状出血.
皮肤有无浸渍现象.
尸体有无挫伤.
分别解剖两只小鼠,观察并记录尸体的内部征象.
气管和支气管是否充满与口,鼻相同性质的泡沫,有无活性炭,观察肺内和气管内有无黑色或蓝色的溺液.
肺的体积有无增大,有无水性肺气肿,有无溺死斑.
右心是否淤血,血液是否凝固.
胃肠内是否有溺液.
内部器官组织中是否能检出活性炭.
六, 注意事项
1,防止动物在淹溺过程中逃跑或咬伤他人.
2,在滴加墨水时,不要滴加红墨水.
淹溺小鼠时,如小不易沉入水中,可用止血钳或镊子夹住小鼠背部少量皮
肤,协助沉入水中,让小鼠在水中淹溺时间长一些,死后形成的蕈形泡沫更明显.
4,解剖小鼠时,最好将两只小鼠分开解剖,以免污染.
5,致死小鼠时,最好不要损伤表皮,以免导致出血.
七,实验报告
1,实验前要求学生写出实验预习报告.
2,实验过程中要求学生填写实验原始记录表
3,实验后写出实验结果
溺死尸体现象记录表
系 专业 学号 姓名 年 月 日
名称
生前入水
死后抛尸入水
呼吸道泡沫及炭沫
爪中异物
水性肺气肿
溺死斑
肋骨压痕
胃内溺液
肠内溺液
组织器官中碳末
口,鼻孔泡沫
实验五,有机磷农药中毒实验
一,实验目的
通过家兔的有机磷农药中毒,了解动物的部分染毒方式并观察中毒现象;通过解剖家兔,了解中毒检材的采取.
二,实验内容和原理
(一)实验内容
家兔注射有机磷农药中毒症状观察.
(二)实验原理
有机磷杀虫剂进入机体后与胆碱酯酶结合,形成稳定的磷酸化胆碱酯酶,使胆碱酯酶失去分解乙酰胆碱的能力,从而造成乙酰胆碱在体内大量蓄积,因而过度刺激中枢神经系统,横纹肌,平滑肌和某些腺体等,使各项功能失调,出现各种神经症状及其他症状,如瞳孔大小变化及肌振颤等.
三,实验器材
家兔,甲基对硫磷 (1605),手术剪,手术刀,镊子,医用手套,注射器,台秤,搪瓷盘,烧杯.
四,实验方式
动物实验
五,实验方法
1,清点实验用品
2,称量家兔体重
3,观察,测量瞳孔大小
4,致死家兔方式
用注射器抽取0.5ml有机磷农药—甲基对硫磷直接注入家兔耳缘静脉.
观察,记录 中毒症状,中毒时间,死亡时间.
5,解剖家兔,采取检材.将中毒死亡的家兔沿腹股沟解剖,注意气味,并观察各脏器的变化.采取血,尿,肺,肝,肾脏器,分别置于不同的容器中,标明脏器的名称,时间,地点,班组,以备送检.
六,注意事项
1,在实验过程中,人体如不慎接触到有机磷农药应立即用肥皂水冲洗,沾有农药的器皿,需用肥皂水或碱性液浸泡,以分解农药.
2,实验结束以后清理场地,实验动物不能乱仍,应深坑埋掉.
3,清点剩余的有机磷农药,妥善保管.
4,洗净双手,结束实验.
七,实验报告
根据要求写出实验报告
毒物分析实验报告
系 专业 学号 姓名 年 月 日
实验名称
实验地点
实验内容
实验原理
实验步骤和
实验记录
实验过程
分析
结论
教师评语
成绩
年 月 日
实验六 血痕检验
一, 血痕预实验
一,实验目的
通过本实验,熟练掌握血痕预实验的各种方法,并能够准确判定结果.
二,实验内容和原理
(一)实验内容
联苯胺试验,无色孔雀绿试验
(二)实验原理
利用血红蛋白或正铁血红素的过氧化酶活性,使过氧化氢释放出新生态的氧,将相应的试剂氧化变色.
三,实验准备
(一)实验器材
天平,量杯,镊子,烧瓶,白瓷板,滤纸,滴管,紫外灯,剪刀,试管
(二)试剂准备
1,联苯胺无水乙醇饱和溶液.
2,无色孔雀绿试剂:无色孔雀绿0.2g,冰醋酸15ml,蒸馏水10ml,溶解.
3,其他试剂:浓硫酸,氢氧化氨,3%双氧水,冰醋酸.
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
(一)联苯胺试验
1,将滤纸折出角,擦拭血痕处,再将滤纸展开,或直接取检材少许置于白瓷板凹内.
2,依次滴加冰醋酸,联苯胺无水乙醇饱和溶液各1滴,此时应不出现蓝色.
3,再加入3%双氧水1滴.
4,立即出现翠蓝色为阳性反应.
(二)无色孔雀绿试验
1,取检材少许置于白瓷板或滤纸上,加无色孔雀绿试剂1滴.
2,再加入3%双氧水1滴.
3,立即出现蓝绿色为阳性反应.
六,注意事项
1,本试验灵敏度高但特异性差,具有氧化性物质或含有过氧化物酶活性的物质都可呈阳性反应.阳性只说明可能是血,而阴性说明不是血或血痕被破坏.
2,必须按顺序滴加试剂,因为某些氧化物可直接将联苯胺氧化成联苯胺蓝.如果先加双氧水,则难以发现此现象,从而影响结果的判定.
3,本试验具有破坏性,因此不能在载体上直接滴加试剂.
4,联苯胺为致癌物质,可用其他类似试剂替代.
七,实验报告
按要求写出实验报告
血痕预试验(联苯胺试验)实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
二 ,血痕的确证试验
一,实验目的
通过本实验,掌握血痕确证试验的原理,方法及结果的判定.
二,实验内容和原理
血色原结晶试验
在碱性溶液中,血红蛋白分解成正铁血红素和变性珠蛋白,再与还原剂作用,使正铁血红素还原成血红素,血红素同变性珠蛋白和其他的含氮化合物(如吡啶,烟碱等)结合,生成血色原结晶.
三,实验器材,试剂
(一)实验器材
显微镜,载玻片,盖玻片,分离针,酒精灯,剪刀,镊子,天平,试剂瓶.
(二)试剂
1,血色原结晶试剂:
(1)取蒸馏水13ml,置于试剂瓶中.
(2)加入葡萄糖3g,溶解.
(3)再加入氢氧化钠0.3g,搅拌,溶解.
(4)取吡啶3ml,加入后充分混合.
(5)配成后置于棕色瓶内备用.
四,实验方式
实验室检验.
五,实验方法
血色原结晶试验
1,取检材少许置于载玻片上,用分离针细心分离纤维.
2,加入高山氏试剂1—2滴,盖上盖玻片.
3,在酒精灯上徐徐加热,至产生气泡为止.
4,冷却后镜检,见红色针状,菊花状结晶为阳性.
六,注意事项
血色原结晶试验
1,试剂久置失效,应置于冰箱内保存,如效力下降可加入少量氢氧化钠,以恢复效力.
2,本实验对血是特异反应,阳性可认为为血,阴性可能是血痕稀薄,水洗,污染.
3,实验前应当用已知血痕测试试剂是否失效.
七,实验报告
按要求写出实验报告
血痕确证试验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
三 血液的ABO血型检验
一,检验目的
通过本实验,熟练掌握血液ABO血型的检验步骤及判定方法.
二,实验内容
直接凝集法
三,实验器材
双凹凹玻板1块,胶头滴管3支,标准128倍抗A,抗B血清,待检血液(浓度稀释至2%左右).
四,实验方式
以小组为单位配发器材,个人独立操作.
五,实验方法
1,取双凹凹玻板一块.
2,在左右两凹中各滴入2%的待检血液两滴.
3,在左右两凹中分别滴加抗A,抗B血清各1滴.
4,摇动均匀,观察结果.
结果判定见下表
结果判定表
待检血液+抗A血清
待检血液+抗B血清
血型
—
—
O
+
—
A
—
+
B
+
+
AB
注:"+"为凝集,"—"为未凝集
注意事项
1,胶头滴管不能混用.
2,观察结果时应轻轻摇动凹玻板,防止出现假阳性
3,待检血液浓度不能太高,防止出现假阳性.
实验报告
按要求写出实验报告
血液ABO血型检验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
待检血液+抗A血清 待检血液+抗B血清 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
四 血痕的种属试验
一,实验目的
了解并观察血痕种属试验的原理,掌握其操作方法及结果的判定.
二,实验内容和原理
环状沉淀反应(包括血痕浸出液的制备;浸出液蛋白含量的测定)
将某一种属动物的蛋白质(抗原)注射于另一种动物的体内.接受注射的动物血清中便产生对该抗原起特异反应的物质(抗体,即沉淀素).取含该抗体的免疫血清与所注射同一种属动物的蛋白质抗原溶液在试管内混合,便产生白色沉淀.此谓血清沉淀反应阳性;否则为阴性.
三,实验器材和试剂
(一)实验器材
离心机,毛细管,试管,试管架,玻璃滴管,沉淀管,沉淀管架,剪刀,记号笔,烧杯,电炉,天平,恒温箱.
(二)试剂
血痕检材,正常兔血清,发烟硝酸,1/1000人血,1/200动物血(猪,狗),l/1000检材浸液,生理盐水,抗人血清沉淀素血清,抗人血红蛋白沉淀素血清.
四,实验方式
实验室检查
五,实验方法
1,血痕浸出液的准备
(1)剪取血痕检材1平方厘米,剪碎后置于试管中,加适量的生理盐水若干毫升.
(2)将试管置室温2小时,冰箱过夜,离心沉淀.
2,浸出液蛋白质含量的测定(2.5倍稀释法).
(1)泡沫试验
①取试管12支,分别加入生理盐水0.5;0.75;0.5;0.5;0.75;0.5;0.5;0.75;0.5;0.5;0.75;0.5毫升.
②取血痕浸液0.5毫升加入第1管,混匀后取0.5毫升加入第2管,混匀后取0.5毫升加入第3管……:依次类推,直到稀释至第11管.这样,血痕浸出液的稀释度从第1管起依次为1:2:1:5;l:10;1:20;1:50;1:100;1:200;1:500;1:1000;1:2000;1:5000;(如下表所示)
管号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
生理盐水
0.5
0.75
0.5
0.5
0.75
0.5
0.5
0.75
0.5
0.5
0.75
0.5
血痕浸出液
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
对照
稀释倍数
1:2
1:5
1:10
1:20
1:50
1:100
1:200
1:500
1:1000
1:2000
1:5000
对照
③用力振摇.若液面上刚刚出现少量稳定气泡的一管(此管内液体颜色为稻草黄色).其蛋白质含量约为1/1000.其他各管的蛋白质含量依此类推.
(2)硝酸法 毛细玻璃管插入2.5倍稀释法获得的检材稀释液中,待液面上升1厘米时取出.用干棉球轻轻擦去管外的液体,再将此毛细玻璃管插入发烟硝酸中,取出后观察两液接触面有无白色环出现,最后有白色环那一管,其浸出液中蛋白质含量约为1/1000.
(3)磺柳酸法 取玻板一块,从第1至第11管中各取1滴稀释液加入各凹内.每凹各加二滴20%磺柳酸液.发生混浊的最后1凹中浸出液的蛋白质浓度约为1/1000.
3,环状沉淀反应的实验操作
(1)取沉淀管13支.1～6支各加入抗人血清沉淀素血清0.1ml,第7支加入正常兔血清0.1ml;第8～13支各加入抗人血红蛋白沉淀素血清0.1ml.
(2)用滴管分别吸取含量为1/1000检材浸液;空白检材浸液;1/1000人血;生理盐水;1/1000人血红蛋白浸液;按下表加入各管,使之与抗人血清沉淀素血清;抗人血红蛋白沉淀素血清;正常兔血清重叠.
管号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
结果判定
沉 淀 管 上 层
检材浸液1/1000
空白检材浸液
人血1/1000
狗血清1/200
猪血清
生理盐水
检材浸液1/1000
检材浸液1/1000
空白检材浸液
人血红蛋白浸液1/1000
狗血1/200
猪血1/200
生理盐水
沉淀管
抗人血清沉淀素
正常兔血清
抗人血红蛋白沉淀素血清
反应结果
+++
-
+++
-
-
-
-
+++
-
+++
-
-
-
对照正确检查为人血痕
立即观察各沉淀管两液接触面有无白环出现,过15分钟,30分钟,60
分钟各观察一次,记录白环出现的时间.如果检材沉淀管60分钟后仍无白环出现,为阴性结果.说明检材上的血痕非人血.60分钟内有白色沉淀环出现,为阳性结果,说明检材上之血痕为人血.
注意事项
1,沉淀素血清必须澄清透明,无菌,效价高,特异性好.
2,试验时,应作阳性与阴性对照,例如空白检材,人血,二种以上动物血,生理盐水,正常兔血清,对照正确,结果才可靠.
3,酸能使沉淀反应增强,甚至出现假阳性反应;碱能使沉淀反应减弱,故反应条件应控制在PH7.0左右.否则,要用0.1%氢氧化钠或0.1N盐酸调整至中性.
4,检材浸液应澄清透明.如果浸液混浊,应先离心沉淀,取上清液作沉淀反应.
七,思考题
1,什么是种属特异性 什么是器官特异性
2,影响环状沉淀试验的因素有哪些
3,作沉淀试验进行种属鉴定时,应同时作哪几个对照试验 为什么要作对照试验
实验七 精斑检验
一 , 精斑的预试验
一,实验目的
通过本实验,掌握精斑预试验的方法,学会观察和判断结果.
二,实验内容和原理
(一)紫外线检验
将未知斑痕放紫外光照射下,观察是否发出银白色带淡紫色荧光.可将发生荧光部位的范围用笔画出来,此处可能为精斑.
(二)结晶试验
利用精液中所含的某种成分与不同的试剂结合形成特定形状的结晶.
三,实验器材,试剂
(一)实验器材
紫外灯,载玻片,盖玻片,剥离针,光学显微镜,天平
(二)试剂
碘,碘化钾,蒸馏水,1%苦味酸溶液
四,实验方式
实验室检验.
五,实验方法
(一)紫外线检验
将检材置于紫外光照射下(波长400~500nm)看有无银白色带淡紫色荧光.有,则为阳性;没有,则为阴性
(二)结晶试验
1.碘—碘化钾结晶试验
(1)将1.65g 碘化钾溶于30ml蒸馏水中,再加入碘2.54g,配成碘—碘化钾试剂.
(2)取可疑斑检材少许,置于玻片上,加一滴生理盐水,将检材浸软,用剥离针细心分离检材纤维.
(3)加碘—碘化钾试剂1—2滴,盖上盖玻片,置光学显微镜下观察.
(4)如出现褐色或红褐色针状,菱形,长矛状结晶,则可能是精斑.
2. 苦味酸结晶试验
(1)取可疑斑检材少许,置于玻片上,用剥离针细心分离检材纤维.
(2)苦味酸溶液1—2滴,盖上盖玻片,置光学显微镜下观察.
(3)如出现黄色菱形,"十"字形,星形或柱状结晶,则可能是精斑.
六,注意事项
(一)紫外线检验
该实验为非特异性反应,所以出现阳性反应也不能确定为精斑,因为其他人体体液,分泌物,染料,肥皂等也可出现类似的荧光.但阴性反应也不能轻易否定,如精斑过于稀薄,陈旧或被其他物质污染,均可无荧光产生.
(二)碘—碘化钾结晶试验
该实验为非特异性反应,人体其他分泌物,某些器官等也可形成类似的结晶;该结晶不稳定,易溶解,生成后1-2小时可自然消失,若再加试剂可再次出现.
(三)苦味酸结晶试验
该试验也为非特异性反应,肝,脾,胰等脏器的浸出液也可形成同样的结晶,但只有人类精斑才可形成此种结晶,其他动物精斑则不能形成.
七,实验报告
按要求写出实验报告
精斑预试验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
二, 精斑的确证试验
一,实验目的
通过本实验,掌握精斑确证试验的方法.
二,实验内容
精子检出法.
三,实验器材,试剂
试管,各种染色剂,显微镜,甲醛,无水乙醇,甲醇,生理盐水
四,实验方式
实验室检验.
五,实验方法
(一)在显微镜下观察精子正常形态.
人的成熟精子似蝌蚪状.长50—70微米,分为头部,中部及尾部.中间部由颈部与结合部(或称体部)组成.
(二)检材处理
1,直接染色检验
新鲜或不很陈旧的精斑,可剪取附有斑迹的纤维少许,置于载玻片上,加生理盐水1滴将纤维浸软,用分离针分离纤维后,加染色液1滴,盖上盖玻片,镜检,在纤维上或其周围发现已经着色的精子,即可确定为精斑.
2,浸出液沉淀残渣涂片检验
取可疑精斑部位检材适量,置试管中,加生理盐水浸没检材即可,轻轻搅动,室温1-2小时,然后用玻璃棒轻敲检材,或用吸管反复冲击检材,除掉载体,3000r/min离心5分钟,取沉淀残渣涂片,染色镜检.
(三)染色液的配置及染色方法
1,苏木素伊红(HE)染色法
(1)苏木素1g加无水乙醇50ml,制成甲液,伊红0.25g加蒸馏水100ml制成乙液.
(2)取精斑检材或浸出液沉淀物,涂于载玻片上,甲醛固定3-5分钟.
(3)加甲液染色5分钟,水洗;加1%盐酸乙醇1滴,水洗;再加乙液染色2分钟,水洗,干燥后镜检.
(4)镜下可见精子头部染成蓝色,尾部染成红色.
2,瑞氏染色法
(1)取瑞氏染料0.1g,加甲醇60ml,在碾钵内碾磨,过滤,制成瑞士染液.
(2)取精斑检材少许,置于载玻片上(或取已浸泡的精斑浸出液沉淀物,涂于载玻片上),加生理盐水1-2滴,细心分离纤维.晾干或电吹风吹干.
(3)甲醛固定3-5分钟.
(4)加染液一滴,染色1-2分钟,滴加缓冲液或蒸馏水再染3分钟,蒸馏水冲洗,除去多余染液,即可镜检.
(5)镜下可见精子头部染成紫色,尾部染成紫兰色.
六,注意事项
应用染色法检验精子时,必须耐心,仔细的在显微镜下查找,只要发现一个典型的精子就可以确定为精斑.但实际工作中,由于精斑过分陈旧,取材部位不准,检验操作粗糙,甚至遇到少精子症等多种原因,往往难于发现典型精子或只见无尾精子,因此必须仔细鉴别.
七,实验报告
按要求写出实验报告
精斑确证试验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
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年 月 日
三 精斑的血型测定
一,实验目的
通过本实验,掌握精斑ABO血型检验的方法.
二,实验内容和原理
(一)吸收法检验精斑的ABO血型
精斑中含有大量血型物质,可与相应的凝集素结合.所以将精斑与己知效价的抗一A,抗一B血清作用后,再测定抗血清的效价减少情况,便可判定精斑的血型.
(二)中和试验法检验精斑的ABO血型
分泌型人精斑中含有水溶性血型物质,将检材浸出液与相应的抗血清混合.若精液中含有血型物质,便可中和相应抗体(即血型物质与相应凝集素相结合)尔后测定被中和后的血清的凝集素的效价便能判定精液中的血型物质.本法准确性较吸收方法为高,且可与精斑的确证试验同时进行.
三,实验器材,试剂
(一)实验器材
凹玻板,载玻片,盖玻片,试管,吸管,剪刀,记号笔,剥离针,显微镜,酒精灯,烧杯等.
(二)试剂
抗A血清,抗B血清,抗H血清,生理盐水,A型人红细胞,B型人红细胞,O型人红细胞.
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
(一)吸收试验
1,取检材0.5~1cm2,分成两等份,放入两个试管中,分别加入效价为16倍的抗A,抗B血清5滴,然后做好A,B标记.
2,置室温或冰箱中30分钟,取出,1000r/min离心5分钟.
3,取上清液按标注字样分别放入凹玻板上下两排凹内,进行二四稀释(上排加抗A血清,下排加抗B血清).
4,向上排各凹内滴加5%A型人红细胞悬液,向下排各凹内滴加5%B型人红细胞悬液,振摇混匀.
5,室温下观察红细胞凝集情况,1小时内判断结果.有时需用抗H血清对精斑进行吸收检测,以确定是O型还是非分泌型.
6,结果判定
吸收试验血型判定
抗A血清+A型人红细胞
抗B血清+B型人红细胞
血型判定
2 4 8 16 32 64
2 4 8 6 32 64
+ - - - - -
+++ ++ + + - -
A
+++ ++ + + - -
- - - - - -
B
+ - - - - -
- - - - - -
AB
+++ ++ + + - -
+++ ++ ++ - -
O
注:"+"表示凝集,"-"表示不凝集
(二)中和试验
1,取浸泡检材的上清液于试管内,将试管置于沸水中煮沸10分钟.
2,离心(1000r/min)15分钟,取上清液备用.
3,配制4%指示红细胞悬液:用生理盐水洗涤抗凝A,B,O型全血三次,再加生理盐水配制成4%的A,B,O型红细胞悬液.
4,抗血清标定:将抗血清效价调整至加入4%红细胞悬液后反应结果不凝为++.
5,以倍数稀释法用生理盐水将检材浸液稀释至1:1024(即共稀释10管).每一种检材浸液稀释三排试管.
6,在各稀释管中加入标定的抗血清,第一排中加抗一A,第二排中加抗一B,第三排中加抗一H,室温下中和30分钟.
7,于各管内加入相应的4%红细胞悬液1滴,室温中放置15分钟,离心(1000r/min)1分钟,观察,记录结果.
8,结果判定:不出现凝集反应为阳性反应,被连续抑制凝集3管以上,同时无精液处检材却无抑制凝集现象,即二者相差3级以上,表明精班中含有相应的血型抗原.具体的结果判定见下表.表中"+"表示凝集,"-"表示不凝集.
中和试验血型判定
反应系统
管号
血型抗原
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
空白处
抗-H抗体加O型红细胞
精斑处
空白处
抗-A抗体加A型红细胞
精斑处
空白处
抗-B抗体加B型红细胞
精斑处
++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
- - - - - - - + ++ ++
++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
- - - - - - - + ++ ++
++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
- - - - - - - + ++ ++
O
A
B
六,注意事项
1,试验时要取己知A型,B型,O型分泌型精斑(或唾注液斑)及检材空白处作对照试验.
2,若检材为非分泌型人的,则试验结果有可能与空白处对照试验的结果相同,故应注意.
实验报告
按要求写出实验报告
精斑ABO血型检验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
实验八 唾液斑的检验
唾液(斑)证明试验
一,实验目的
通过本实验,掌握唾液(斑)的证明方法.
二,实验内容和原理
唾液淀粉酶检出试验淀粉遇碘变蓝,唾液中含有大量淀粉酶,能将淀粉分解为糖,糖遇碘不变蓝.如将检材斑痕先与已知淀粉溶液混合,一定时间后,再加入碘,若不变蓝,说明淀粉已被分解,从而证明检材中含有淀粉酶.
三,实验器材,试剂
白瓷板,试管,沉淀管,吸管,离心机,恒温箱,水浴加热箱.蒸馏水,生理盐水,碘化钾,碘,0.05%的可溶性淀粉溶液.
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
1,取蒸馏水100ml,加入碘化钾0.5g,溶解后,再加入碘0.3g溶解,制成碘液,临用时,再用蒸馏水稀释100倍即可.
2,取可疑唾液(斑)适量,同时取检材无斑痕处,分别置白瓷板凹中.
3,各加0.05%的可溶性淀粉溶液0.1ml,充分混合后,置37℃温箱或水浴内40-60分钟.
4,向检材及对照凹内各加碘液1滴,观察颜色变化.
5,无斑痕对照凹内应立即出现蓝色,如检材呈淡黄色或无色,说明有淀粉酶存在;如检材一样呈现蓝色,说明检材中无淀粉酶或被破坏.
六,注意事项
淀粉酶并非唾液中所特有,它广泛存在于动物,植物,发芽的种子及酵母菌中,因此,检验时应考虑检材的具体条件,有无出现假阳性的可能.另外,陈旧的唾液(斑)或其他物质的干扰,可能使酶的活性降低或消失,从而出现假阴性结果.
七,实验报告
按要求写出实验报告
唾液(斑)证明实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
实验九 毛发检验
一 毛发的基本形态观察
一,实验目的:
通过本实验,掌握人毛发的组织结构,了解人毛发与纤维,兽毛的鉴别方法和鉴别要点.
二,实验内容:
1,毛发形态学的肉眼和镜下观察
2,动物毛和植物纤维,人造纤维的区别
3,人毛和兽毛的区别
三,实验器材
显微镜,剪刀,镊子,蒸发皿,载玻片,盖玻片,试管,酒精灯,各种动物毛
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
(一)肉眼观察:毛发分为毛根,毛尖,毛干三部分.毛在皮肤里面的部分为毛根,其起端膨大呈球状,称为毛球.露在皮肤外面的部分为毛干,其为毛发的主要部分.毛干的游离末端渐细而尖,称为毛尖.一般完整的毛发都有这三个部分,不同种属与身体上不同的毛发可有颜色不同,粗细不同,弯直不同.
(二)镜下观察
毛干由毛小皮,皮质,髓质组成.
l,毛小皮:在毛的最外层,由角化的无核无色素的扁平细胞组成.互相重叠,游离缘指向毛尖,成鱼鳞状或屋瓦状.鳞片可形成鳞状花纹,因种属不同而异.
2,皮质:在毛干的中层,其中有色素颗粒沉着.
3,髓质:在毛发中轴,含有色素,显微镜下观察,透射光下呈现黑色非毛发者(如植物纤维),不会有毛小皮,皮质,髓质三层结构.
注意观察毛囊的形态及其变化情况,新剪断的毛发和长期为修理过的毛发有何区别;毛发受到不同损伤(如砸损,烤焦,火烧)时的形态变化,以及毛发附着物等.对含色素较多的深色毛发观察不清时,可将毛发浸于10%~20%的硝酸或30%过氧化氢中脱色,至浅褐色即可,然后用水洗,无水酒精脱水,移至载玻片上,并用中性树胶封固,便可清晰观察.
(三)毛发与类似纤维的区别
显微镜下观察毛发与类似纤维在形态,结构上的差异.也可通过化学实验对它们进行区别,毛发能溶于氢氧化钠等强碱性溶液中,植物纤维则不溶;植物纤维能溶于50%的硫酸中,毛发则不溶.
(四)人毛与兽毛的区别
将兽毛与人毛一样制成标本,在显微镜下观察其组织结构,并进行比较.如下表:
二,人毛与兽毛的鉴别
名称
人毛
兽毛
毛小皮
皮质
髓质
鳞片薄,较短而宽,毛小皮印痕呈较细而不规则的波浪形横纹.
较宽.占毛干的大部,色素颗粒多集中于皮层的外围,毛尖部分色素明显减少.
不发达,常呈断续状,有时缺如,较窄,占毛干直径的1/3以下.
鳞片较厚,粗而宽,毛小皮印痕的纹理呈粗锯齿状或斑纹状.
较窄,一般只占毛干一半或更少,色素颗粒多集中于近中央部位.
较发达,均匀,呈现连续状直至毛尖,较宽,通常占毛干直径的l/3以上.
三,毛发的血型测定
一,实验目的
通过本实验,掌握毛发的ABO血型检验方法.
二,实验内容和原理
毛发皮质的细胞中含有A,B,H血型物质,但量微小.可用混合凝集法和解离法测定.操作时,先将毛发洗净,用酒精脱脂,砸扁,其余与血痕检材的操作方法相同.
(一)混合凝集试验
抗原,抗体发生特异性结合以后,再加相应的红细胞时,与检材特异性结合了的抗体可同时与红细胞结合,结果是检材,抗体,红细胞三者的结合,镜下可见红细胞附着于载体上.此法是一种"三明治"式的免疫反应,也称为"夹心法","红细胞粘连实验".
(二)解离试验
在适宜的温度下(4℃),毛发中的凝集原可与相应的凝集素特意性结合,这种结合在一定条件下(加热至56℃)又可分离而释放凝集素,然后用相应的新鲜红细胞测定解离液中的凝集素,从而判定毛发的血型.
三,实验器材,试剂
(一)实验器材
显微镜,剪刀,镊子,蒸发皿,载玻片,盖玻片,试管,酒精灯,轧毛机,保湿盒,恒温箱
(二)试剂
乙醚,冰醋酸,甲醇,乙醇,抗A血清,抗B血清,A型人红细胞,B型人红细胞,3%氢氧化钠,生理盐水,10%鸡蛋清生理盐水
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
(一)混合凝集试验
1,取待检毛发长2cm,用洗涤剂洗净,擦干,乙醚脱脂数分钟,用轧毛机将其压扁,使其厚度为原来直径的3~4倍.
2,等分成两段分别放入凹玻板内,标注"A","B",按标注字样分别加入校价为128倍以上的抗A,抗B血清1滴.
3,放入保湿盒内37℃温箱中1小时,再移至冰箱内1小时,然后取出毛发,用滤纸吸去其表面多余血清.
4,用冷生理盐水轻轻洗涤后吸干,分别加入相应的2%~5%A型人,B型人红细胞悬液一滴,室温静至30分钟.
5,轻轻将毛发移至已放有1滴生理盐水的载玻片上,盖上盖玻片.
6,镜下观察红细胞的附着情况,有红细胞附着为阳性.
(二)解离实验
1,取待检毛发,用洗涤剂洗净,擦干,乙醚脱脂5分钟,56℃干燥.
2,剪取处理后的毛发检材1cm并剪碎放入锥形试管中,加3%氢氧化钠3~5滴,置100℃水浴中溶解,再加入3%冰醋酸3~5滴,调成中性.
3,取载玻片一块,用玻璃铅笔在左右各画一直径1cm的圆,分别标上"抗A","抗B",在圆内滴一滴10%鸡蛋清生理盐水,再吸走,然后各滴一滴毛发溶解液,置56℃温箱中干燥.
4,各加1滴固定液(甲醇:乙醇=1:2),令其自然干燥.
5,按标记加入抗A,抗B血清各1滴,放入保湿盒至冰箱内1小时.
6,将载玻片在冷自来水中上下提放6~8次,冷生理盐水中提放1~2次,用滤纸吸干水分.
7,按标记加入0.5%A型人,B型人红细胞悬液各一滴,置56℃温箱中保湿解离8~10分钟.
8,取出载玻片,冷却,镜检.
六,注意事项
1,混合凝集实验时,毛发一定要充分压扁,以暴露毛发髓质和皮质细胞膜上的抗原结合点.
2,抗血清要特异性好,效价要在128以上.
3,吸收时间至少要在1小时以上.
七,实验报告
按要求写出实验报告
毛发ABO血型检验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现象 结论
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
实验十 骨器检验
一,实验目的
通过本实验熟悉人类骨骼的组成,掌握人骨与兽骨的区别,熟悉骨质检验方法,理解利用骨质检验人的ABO血型的原理.
二,实验内容和原理
1,观看人类骨骼组成的大体标本
2,人骨与兽骨的区别
3,骨质血型检验
骨组织与其他人体组织一样含有ABH血型的物质,且较稳定,在适宜的温度(4℃)下,骨组织的凝集原可与相应的凝集素特意性结合,这种结合在一定条件下(加热至56℃)又可分离而释放凝集素,然后用相应的新鲜红细胞测定解离液中的凝集素,从而判定骨质的血型.
三,实验器材
铁锉,显微镜,剪刀,镊子,吸管,载玻片,盖玻片,凹玻板,试管,保湿盒,恒温箱,乙醚,甲醇,128倍以上的抗A血清,抗B血清,2%鸡蛋清水溶液,0.5%A型人红细胞悬液,0.5%B型人红细胞悬液
四,实验方式
实验室检验
五,实验方法
一 ,人类骨骼的组成(观看大体标本)
人体约有206块骨,组成人体支架,分颅,躯干骨和四肢骨(上肢骨和下肢骨)三部分.各骨端借软骨,韧带或关节连接起来.
(一)颅:由23块大小和形状不同的骨组成,分为脑颅和面颅两部分.
1,脑颅位于后上方,形成颅腔,保护脑髓.脑颅有颅顶和颅底之分;
(1)颅顶有额骨,顶骨,枕骨和颞骨组成.额骨与顶骨之间有左右方向的冠状缝,两侧顶骨之间有前后方向的矢状逢.枕骨和顶骨之间有人字缝.
(2)颅底有颞骨,筛骨,蝶骨,颧骨,枕骨组成,在内面形成三个窝,即颅前,中,后窝.承托脑髓.
2,面颅位于前下方,形成面部轮廓并构成眶,鼻腔和口腔的骨性组织.其组成包括上颌骨,鼻骨,颧骨,泪骨,下鼻甲,颚骨,梨骨,下颌骨和舌骨.
(二)躯干骨:包括组成脊柱的24块单个椎骨(颈椎7块,胸椎12块,腰椎5块),1块骶骨,1块尾骨以及组成胸廓的12对肋骨,肋软骨和1块胸骨.
(三)上肢骨:包括肩胛骨,锁骨,肱骨,尺骨,挠骨,腕骨(8块舟骨,月骨,三角骨,腕豆骨,大多角骨,小多角骨,头状骨,钩骨),掌骨(5块)和指骨(每指三节,拇指二节).
(四)下肢骨:包括髋骨(由髂骨,耻骨,坐骨组成),股骨,髌骨,胫骨,腓骨(7块:距骨,跟骨,舟骨,骰骨,三块楔骨),跖骨(5块)和趾骨(3节,拇指为2节).
二,人骨与兽骨的鉴别
(一)大体形态学检查:对完整的骨骼只要将全骨排列成形,根据人体解剖学和动物解剖学等专门知识,检查各骨的形态,大小,长短,粗细,以及检查牙齿等,互相比较,不难判断.但对不完整的细小骨片,则需用其它方法进行检验.
(二)组织学检查:人骨质较薄,兽骨则髓少而骨厚.取致密骨作成骨磨片在显微镜下检查,骨质内可见哈佛氏管.人,兽骨的哈佛氏管的差异见下表
名称
人骨
兽骨
形态
数目
直径
规则,多为圆形,层次排列显著.
比较少
比动物的大两三倍.
不规则,多为长圆形,层次排列不显著.
多
小
(三)生物学检查:将骨片挫成粉末,用生理盐水制成浸出液.此液与抗人血清沉淀素血清或抗人骨沉淀素血清作沉淀反应,操作方法与血痕的沉淀反应相同.结果如出现白色沉淀环,则检材为人骨,否则为兽骨.
三,人骨的血型测定
人骨中含有A,B,H血型物质,可以与相应的抗体结合.可利用已知抗血清测定骨质的血型.但应防止检材上附着的细菌及外源性A,B,H抗原,影响测定结果.
步骤:
1,刮去骨上附着的软组织,煮沸5分钟,再刮净软组织,吹干.
2,将骨骼(最好是骺端的骨松质)用铁锉或铁锯的方法制成骨粉.
3,置骨粉于烧杯中加入适量乙醚并搅拌,过滤,以除去脂肪.
4,干燥后用80目的筛子取80目以下的骨粉.
5,用透明胶纸贴取骨粉,使呈现砂纸状,然后剪下0.2×0.5厘米的2块骨粉胶纸.
6,将骨粉胶纸分别置于标有A,B的凹玻片凹内,对应的加入效价1:128的抗一A和抗—B血清.
7,置保湿盒内,室温下放30分钟后移至4"C冰箱中2小时.
8,取出胶纸条,放在滤纸上,吸去多余的抗一A,抗一B血清.
9,将胶纸片放入纸50毫升冷生理盐水中摆动洗涤15—20次,取出重换盐水再如此洗涤一次,然后分别放入标记好的试管内.
10,分别对应加入0.5%的A,B型红细胞悬液2滴.
11,56℃温箱中放15分钟后,以1000r/min的速度离心15秒,轻摇试管,使红细胞悬浮,然后倒出置于玻片上镜检.根据红细胞凝集情况判断血型(判断方法同血痕解离试验相同).
四,人骨的性别检查
一般男性的骨骼粗大,骨凸明显,骨面粗糙,骨质较重.女性的骨骼较为纤细,骨凸不明显,骨面光滑,骨质较轻.一般说来,同龄男子的骨骼比女子的骨骼在大小,厚薄,重量,突起,节结,隆线等方面均较大.
法医学上鉴定骨骼之性别,以检查骨盆为最可靠,其次为头颅骨及四肢骨.男女骨盆的区别见下表:
名称
男性
女性
全体
骨盆壁
入口
盆腔
骶骨
髋骨
闭孔
坐骨切迹
出口
耻弓
髂翼的位置
狭小而长,骨质重.
肥厚粗糙,侧壁内倾而深.
呈楔形或心脏形,前后两部狭窄,横径接近于骰呷.耻骨联合后方角度狭窄.
狭小而深,上口大下口小,呈漏斗状.
呈等腰三角形,前面较直,向前倾斜.
浅
长椭圆形
狭窄
横径及前后径狭小
角度较小,约70°—75°
垂直
宽大而短,骨质较轻.
纤薄平滑,侧壁直而浅.
呈圆形或椭圆形,前后两部宽阔,横径大于前后径,耻骨联合后方角度中等.广阔而浅,呈圆桶状.
呈等边三角形,前面凹陷.上部平直,下部前倾.
深
宽三角形
宽大
横径及前后径宽大
角度较大,约90°一100°
水平
六,注意事项
1,洗涤的程序要掌握好,不足与过头均会导致错误结果.
2,抗血清效价一定要在128倍以上,以免出现假阴性.
3,注意保湿,避免干燥.
冷生理盐水冲洗时动作要轻,可根据个人手法摸索洗涤次数.
指示细胞要新鲜,以免出现假阴性,浓度要适当,不可过高,以免出现假
阳性.
6,每次试验应同时作阳性,阴性对照试验.
七,实验报告
按要求写出实验报告
骨质ABO血型检验实验报告
系 专业 学号 姓名 时间: 年 月 日
实验
目的
实验
内容
实验
原理
实验
方法
实验
分析
现 象 结论
抗-A 血清+A型人红细胞 抗-B血清+B型人红细胞
误差
分析
教师
评语
成绩
年 月 日
主要参考文献:
1. 刘瑛主编:《法医学教程实验指导》,中国人民公安大学出版社2004年版.
郭景元主编:《法医物证学》,中国人民公安大学出版社1997年版.
姜泊主编:《分子生物学常用实验方法》,人民医学出版社1996年版.
郭景元,李伯龄主编:《法医物证学》,中国人民公安大学出版社2002年版.
王成祥主编:《法医学实验指导》,群众出版社2000年版.
6. 常武,韩均良主编:《刑事技术实验指南》,警官教育出版社1997年版.
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