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吴胜英等纳豆素对大鼠腹主动脉血栓形成的抑制作用吴胜英等.纳豆素对大鼠腹主动脉血栓形成的抑制作用 5
[文章编号]1oo6—9674(2oo3)O1一OO5一O4
纳豆素对大鼠腹主动脉血栓形成的抑制作用
吴胜英 ,钟光珍 ,董献红.,任永生 ,梁学军'',唐朝枢
( 郧阳医学院病生理教研室,湖北十堰442000.北京大学第一医院心血管研究所
.河南省新乡医学院生理学教研室;''北京大学医学部公共卫生系)
[摘要] 日的:在复制大鼠血栓模型上,通过动态观察血压的变化,比较血栓的大小以及检测纤溶酶原激活物抑
制物(PAD,组织型纤溶酶原激活物(tPA)活性等指标,观察纳豆索的溶栓效应.方藩:S—D大鼠随机分五组(,l=
40),用不同浓度的纳豆索灌胃,同等剂量的蚓激酶设为阳性对照,用Powerlab/4s生理多导仅描记股动脉血压,血
栓干重用考马斯亮蓝法蛋白定量,采用酶联免疫法测定血浆中PAI及tPA活性.结果:纳豆索组与对照组,单纯
血栓组相比,复制血栓前血压无显著性差异(P>O.o5),血栓复制后40 rain,纳豆索组,蚓激酶组血压下降幅度(一
11.62士7.36 ,一8.37士1O.29 ,一7.28士4.54 )与单纯血栓组血压下降幅度(--59.97士12.29 )相比具有显
著性差异(P<O.01);纳豆索处理的动物与单纯血栓组动物比较,其血栓的湿重,干重,蛋白含量显著性降低(P<
0.01);纳豆索组,蚓激酶组血浆中tPA活性升高, /tPA比值与对照组相比显著降低(P<O.01).结论:纳豆索
抑制动脉血栓的形成,提高纤维蛋白溶解活性.
[关键词]纳豆,血栓形成;溶栓;主动脉,腹;大鼠
[中国法分类号]R878.99 [文献标识码]A
of Natt0Idl豫蚰the fommtioa of 加rta''II rat WU Sheng--埘,zH()NG
Guang--Zhenz,DONG)【iarI—Hong3,以a1.( DP加砌姗f of Pathophysiology,Yunyang Medical College,
Shoan,HubeiProvince,442000t.DepartmentofPhysiology,PekingUniversity Health ScienceCenter,Beijing
1Ooo83)
珧hlct:Obiectivo To study the effect of Nattokinase On the thrombus formation in the thrombus model,the
change of blood pressure,the size of thrombus and the activity of plasminogen activator inhibimr(PA1)Or tissue
plasminogen activator(tPA)were measured.Methocls Before making thrombus model by coating the abdornial aorta
tl1 fUter paper soaked in 30 R 3.
S—D rats were divided into five groups randomly,fed tl1 Nattokinase Or
Lumbrukinaseor normal chow respectivdyfortwodays. efemoralarterypressuresweretraced byPowerlab/4s.
The protein contents of the thrombus were determined by Bradford method.The PAJ and tPA activitywere detected
by日胤Re铷№Thedecreasedlevd 0ffemoral artery pressureofthe ratsfedwithNattoklnase orLumbmkimse
were lower(一11.62士7.36 ,--8.37士1O.29 ,--7.28士4.54 )than that of the rats fed with normal chow(一
59.97士12.29 ,P<O.01).The wet weight,dry weight Or the protein content of the thrombus were significantly
lower On the rats fed with Natto than that on the rats fed with normal chow(P<O.01).The t队activity increased
while the PAI/tPA ratio decreased significantly in plasma of the rats fed with Nattokinase or Lumbrukinase.com-
pared withthatinplasmaofthe ratsfedwithnormal chow(P(O.01).CoI1clusionNattokinase caninhibittheforma—
tion of thrombus and promote the fibrinolysis acitivity in plasma.
Key words:nat''to,thrombosis,thromholysis;aorta,abdominal;rats
血栓形成是引起心肌梗死,脑卒中等心脑血管
疾病死亡的重要因素,抑制血栓形成和增强纤溶活
性对心脑血管疾病防治具有重要意义.从膳食成分
中发现和开发抗栓和溶栓物质,具有广泛的临床实
[作者简介]吴胜英(1966一),女,湖北十堰市人,学士.讲
师,郧阳医学院病理生理学教研室,现从事心血管病理生理
学的研究.
用价值.日本食品纳豆(Natto),类似于我国的豆
豉,以大豆为原料,经发酵(主要为纳豆菌,即枯草杆
菌Bacillus subtilis)作用后生成.大量实验和临床
资料表明,纳豆食品不仅营养丰富,而且对心脑血管
疾病[1],骨质疏松[2]等均有一定的预防和治疗效
果.1987年Sumi等r33人从纳豆中提纯出纳豆激酶
(Nattokinase),发现其能激活纤维蛋白溶解酶,发
挥溶栓作用,但纳豆的溶栓效应机理尚未完全阐明.
6 郧阳医学院学报(J YMC)2003年2月,22(1).5
本工作用纳豆的粗提物纳豆素在大鼠的血栓模型
上,观察其对血栓形成的影响,以探讨纳豆的作用机
理及临床应用价值.
1材料和方法
1.1材料
健康雄性S—D大鼠4O只,体重200--~250 g左
右,由北大医学部动物中心提供;纳豆素由北京大学
医学部公共卫生系提供;蚓激酶购于北京百奥药业
有限责任公司,京卫药准(1996)第127002号;PAI,
tPA试剂盒购自上海实业——医大生物技术有限公
司;其它试剂为市售分析纯.
1-2大曩血栓模型制作及实验分组
参照Kurz等[43方法复制动脉血栓形成模型,
大鼠禁食8 h,自由饮水,用2o 乌拉坦腹腔注射(5
ml/kg)麻醉,股动脉插管经换能器在生理多导仪上
监测股动脉血压,腹正中切口,游离约2 cIn长的腹
主动脉,用3O FeCl3浸渍过的滤纸(1 em×1 an)
仔细包裹腹主动脉(小心保护周围组织),30 min后
取除滤纸条,观察10 min后结束实验.
实验分组:①单纯血栓组(A组):操作见上述;
②低剂量纳豆素组(B组):预先用纳豆素30 mg/
(kg 次),2次/日灌胃,连续两日,血栓制备同第一
组;③高剂量纳豆素组(C组):纳豆素灌胃,剂量为
300 mg/(kg 次),2次/日,其它操作同前;④蚓激
酶组(D组):方法同第二组,但用蚓激酶灌胃,剂量
为30 mg/(kg 次),2次/日;⑤对照组(E组):用
生理盐水浸泡过的滤纸包裹腹主动脉,其操作同第
一组.
1-3监测指标
监测血栓翎备前和后10 min股动脉血压的变
化;结束实验时,胸主动脉穿刺抽血5 IIll,3.8 枸
椽酸钠液(含EDTA 1 mg/m1)抗凝,离心分离血浆,
按试剂盒说明书,用酶联免疫吸附法测血浆PAI和
tPA活性;准确摘取滤纸覆盖的腹主动脉段的血栓,
称其湿重,并在烤箱内(90℃过夜)彻底干燥后称其
血栓干重,并将其溶于2 ml NaHCO3溶液中(O.1
mol/L NaOH溶液中含2 Naz C03),沸水浴3
min,用考马斯亮蓝法蛋白定量,计算血栓的蛋白含
量Is](gg pro mg- DW).
1.4统计学分析
数据处理数据以均值士标准差表示,用one—
way ANOVA作统计学处理,组间比较用Student
—Newman--Keuls(SNK)方法检验,P<0.05为
差异有显著性.
2结果
单纯血栓组动物股动脉血压在血栓复制后较血
栓复制前降低6O (PO.05)(见表1).
, 衰1实验动物在复制前后股动脉血压变化
一P<O.O1,与单纯血栓组相比
与单纯血栓组相比较,治疗各组血栓湿重,血栓
干重和血栓蛋白含量均明显降低(P值均<O.01),
高剂量纳豆素组与蚓激酶组血栓湿重均轻于低剂量
纳豆素组(PO.05)(见表2).
衰2各实验组血栓湿重,干重,蛋白定量( 士s)
.P<O.05,一P<O.OOl,与单纯血栓组相比(A组)} P<O.O1,与低剂量纳豆组相比(B组)
与对照组相比较,血栓形成既激活PAI也激活 水平明显低于单纯血栓组,而tPA水平显著高于单
tPA(P均<O.01),PAI/tPA比值显著降低(P<O. 纯血栓组(P均Pb:f=0.01),PAI/tPA的比值进一步
O1),表明内源性纤溶系统代偿激活.治疗各组PAI 降低(PO.05)(见图1~3)
A B C D E
图1纳豆激酶对tPA的影响
一P<0.001与对照组相比(E组),#P< O1
与单纯血栓组相比(A组),.P<0.01与低纳豆组
相比(具体分组见正文)
A B C D E
图2纳豆激酶对PAl的影响
一P<0.01与对照组相比(E组), P<O.O1
与单纯血栓组相比(A组),.P<0.01与低纳豆组
相比(B组).

a一
,,
H
C
a一
15
10 5 0
A B C D E
图3纳豆激酶对PAI/tPA的影响
一P<0.001与对照组相比(E组),#P0.
05);血栓复制后40 min,纳豆素组,蚓激酶组与单纯
血栓组相比,股动脉血压下降幅度显著低于单纯血
栓组.此外,纳豆素组与单纯血栓组比较,经纳豆素
处理的动物其血栓的湿重,干重,蛋白量降低.结果
表明纳豆素明显抑制大鼠腹主动脉血栓形成,其效
果与蚓激酶组没有显著性差异.血栓形成(单纯血
栓组)既激活PAI也激活tPA,tPA,PAI均高于对
照组,而PAI/tPA显著减少(P<O.01),表明内源
性纤溶系统激活.低,高浓度纳豆素组血浆tPA活
性高于对照组,单纯血栓组,而与蚓激酶组相I比较具
4 3 2 1 0
一.【 .【fl一《
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有同等的效应;低,高浓度纳豆素组血浆PAl/tPA
的比值明显低于对照组,单纯血栓组f而与蚓激酶组
无差异.
纳豆的抗栓机制尚未完全阐明,tPA,PAl是纤
溶系统关键物质,tPA和PAI主要由血管内皮细胞
合成和释放,tPA通过激活纤溶酶原而启动纤溶过
程,PAI为tPA的快速抑制物.tPA活性升高和/
或PAl活性降低可导致纤溶功能升高.Urano T
等[9]发现纳豆激酶可裂解活性重组的原核PAI一1
(rpPAI--1),从而导致rpPAI一1活性丧失.无论
是否存在rpPAI一1,纳豆素均可呈剂量依赖性地增
加纤维蛋白溶解活性.在没有rpPAI一1时,NK可
直接增加纤维蛋白溶解活性;而当 AI一1存在
时,纤维蛋白溶解活性的激活似乎与rpPAI一1裂解
失活有关,这可能是纳豆激酶增强纤溶的重要机制.
本实验中,纳豆素组血中的tPA量显著升高,提示
纳豆素可能通过激活tPA,削弱或抑制PAl的活性
而促使纤维蛋白溶解.
纳豆是一种常见的食品,其中的多种活性成份,
分别具有抗栓和溶栓,预防和治疗骨质疏松,抗感
染,抗肿瘤等多种生物学效应,且无明显毒副作用等
特点,作为保健食品和药源的开发具有一定的临床
参考价值.本实验中用纳豆的粗提物纳豆素,仅研
究其溶栓机制,其它生物学效应尚待进一步证实.
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[收稿日期]2o02—12—15
396285
·上一篇:西咪替丁对血小板功能及血栓形成的影响
·下一篇:预防骨科大手术后深静脉血栓形成的专家建议
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